- 王超雨;李杰平;南映瑜;李启英;项颖;刘耀;
目的:探讨乏氧条件下人急性髓系白血病细胞系缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和CD47表达的变化。方法:应用流式细胞术检测人急性髓系白血病细胞系U937、HL-60和K562细胞表面CD47的表达情况。将U937、HL-60和K562细胞分为低氧处理组和常规处理组,常规处理组细胞系进行常氧(20%O_2)培养,低氧处理组细胞系进行乏氧培养(1%O_2),24 h后收集两组细胞,应用实时定量PCR法检测细胞CD47基因表达水平的变化,Western blot法分析HIF-1α和CD47蛋白表达水平的变化。结果:CD47在人U937、HL-60和K562细胞中的阳性率均值分别为98%(98%±0.03%)、99%(99%±0.05%)和75%(75%±0.11%)。U937和HL-60细胞经乏氧处理后其CD47 mRNA表达水平显著上调(P<0.05),而K562细胞CD47 mRNA表达水平未见明显变化(P>0.05)。U937、HL-60和K562细胞经乏氧处理后其HIF-1α和CD47蛋白水平均显著上调(P<0.05)。结论:乏氧可导致人急性髓系白血病细胞CD47表达水平上调,其作用机制可能与HIF-1α有关。
2022年04期 v.30;No.158 979-983页 [查看摘要][在线阅读][下载 1214K] [下载次数:151 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] - 张成思;许建霞;邓发滑;胡华丽;王斯奇;黄海;韦四喜;
目的:探讨下调ANRIL(Antisense non-coding RNA in the INK4 Locus)表达对Kasumi-1细胞增殖和凋亡的影响及其相关分子机制。方法:使用重组慢病毒构建下调ANRIL表达的Kasumi-1细胞(sh-ANRIL组)及其对照组细胞(sh-NC组),荧光显微镜观察慢病毒对细胞的转染效率,RT-q PCR检测敲低效率及急性髓细胞白血病(AML)患者外周血和骨髓中ANRIL的表达水平。CCK-8法和流式细胞术检测下调ANRIL表达对Kasumi-1细胞增殖和凋亡的影响。Western blot检测下调ANRIL表达后Kasumi-1细胞中PI3K、AKT、p-AKT等相关蛋白分子的表达。结果:ANRIL在AML患者外周血和骨髓中呈高表达;重组慢病毒对Kasumi-1细胞的转染效率>90%,敲低效率为70%;CCK-8结果显示,下调Kasumi-1细胞中ANRIL表达能够显著抑制细胞增殖,当DNR作用24、48、72 h,sh-ANRIL组的细胞增殖抑制率分别为(47.40±1.49)%、(69.11±0.51)%和(91.82±1.10)%,均显著高于sh-NC组(40.69±1.70)%(P<0.05)、(58.93±1.74)%(P<0.01)和(82.93±0.37)%(P<0.001);流式细胞术分析显示,sh-ANRIL组细胞凋亡率为(10.29±0.58)%,显著高于sh-NC组的(5.42±0.67)%(P<0.01),当DNR作用24 h,sh-ANRIL组细胞凋亡率为(54.41±1.69)%,显著高于sh-NC组的(38.28±1.42)%(P<0.001);Western blot结果显示,sh-ANRIL组PI3K、p-AKT、PCNA、BCL-2蛋白水平较sh-NC组显著降低,而BAX蛋白的表达增加。结论:ANRIL可能通过PI3K/AKT信号通路影响Kasumi-1细胞增殖和凋亡,ANRIL是AML的潜在治疗靶点。
2022年04期 v.30;No.158 984-989页 [查看摘要][在线阅读][下载 1488K] [下载次数:143 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] - 刘奔;董雯;孙杰;潘凌鸿;程学英;伦永志;
目的:研究PI3K-Ⅲ样功能多肽诱导白血病细胞K562程序性死亡的作用机制。方法:采用毕赤酵母表达系统获得纯化PI3K-Ⅲ样功能多肽;采用MTT法与平板克隆形成试验检测PI3K-Ⅲ样功能多肽对K562细胞增殖能力的影响;流式细胞术检测K562细胞的凋亡与细胞周期;透射电子显微镜检测细胞超微结构的变化;ELISA方法检测Caspase-3表达;Western blot检测K562细胞ATG4B、Beclin-1、Bcl-2、LC3-II等蛋白表达。结果:PI3K-Ⅲ样功能多肽能够抑制K562细胞的增殖及克隆形成,与对照组细胞相比抑制率明显增高(P<0.05);功能域蛋白作用后,K562细胞呈现凋亡状态,且伴随自噬体形成;细胞G0/G1期所占比例明显升高,S期所占比例明显降低,细胞生长多停滞于G0/G1期,与对照组细胞比例存在显著性差异(P<0.05);随着多肽作用浓度增加,Caspase-3蛋白表达显著增加,与对照组相比有显著差异(r=0.966,P<0.05);功能域蛋白作用K562细胞后不同时间点ATG4B、Beclin-1的表达呈先升后降、LC3-II的表达呈上升、Bcl-2的表达呈下降趋势。结论:PI3K-Ⅲ样功能多肽可诱导白血病细胞K562发生程序性死亡,Beclin-1/Bcl-2与Caspase通路可能参与其中,自噬与凋亡可能均有发挥作用。
2022年04期 v.30;No.158 990-997页 [查看摘要][在线阅读][下载 1311K] [下载次数:126 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] - 孔惠敏;苏伟青;罗毅;戈慧;李亮;杨默;江千里;
目的:探讨血小板反应蛋白-1(TSP-1)对人巨核细胞白血病细胞系Meg-01凋亡的影响及可能的机制。方法:应用流式细胞术和免疫细胞化学染色检测Meg-01细胞CD36抗原的表达;采用不同浓度的TSP-1和CD36抗体FA6-152作用于Meg-01细胞,培养48 h,应用流式细胞术检测细胞的早期凋亡和凋亡蛋白酶Caspase-3的活性;采用细胞计数和小鼠巨核细胞集落(CFU-MK)培养探究TSP-1对巨核细胞生长分化的影响。结果:流式细胞术和免疫细胞化学染色结果均显示,Meg-01细胞表面有CD36抗原的表达。TSP-1(5μg/ml)对Meg-01细胞的生长起到抑制作用,而对CD36-的M-07e细胞作用不明显;加入CD36抗体FA6-152(5、10和25μg/ml)之后,TSP-1的抑制作用明显减弱。TSP-1(2.5、5和7.5μg/ml)增加Annexin V的阳性表达(P<0.01),并激活Caspase-3(P<0.01),表明TSP-1诱导细胞凋亡的作用显著;加入CD36抗体FA6-152(25μg/ml)之后,TSP-1诱导Meg-01细胞凋亡的作用明显减弱。TSP-1(5、10和25μg/ml)对小鼠骨髓细胞的CFU-MK形成也有明显的抑制作用,而β-TG则没有这种作用;CD36抗体FA6-152(25μg/ml)可明显减弱TSP-1对CFU-MK的抑制作用。结论:TSP-1有可能通过CD36/Caspase-3诱导巨核细胞白血病细胞系Meg-01细胞凋亡,这为临床上治疗巨核细胞白血病提供了潜在的新药开发研究靶点。
2022年04期 v.30;No.158 998-1004页 [查看摘要][在线阅读][下载 1250K] [下载次数:291 ] |[引用频次:3 ] |[阅读次数:0 ] - 何玮;赵彩芳;陈丽;胡慧仙;
目的:探讨氯喹(CQ)联合热休克蛋白90抑制剂BIIB021对T315I突变的慢性粒细胞白血病(CML)p210-T315I细胞凋亡的作用及相关机制。方法:将p210-T315I细胞株按不同处理分为对照、BIIB021、氯喹、BIIB021+氯喹共4组。经过BIIB02和/或CQ处理24 h后,流式细胞术检测细胞凋亡,DAPI染色观察细胞核形态及凋亡情况;Western blot检测凋亡相关蛋白caspase 3、PARP,自噬相关蛋白p62、LC3-I/II的表达情况。皮下注射p210-T315I细胞,构建CML小鼠荷瘤模型,模型建立后治疗组分别给药(BIIB021和/或氯喹),对照组给PBS和生理盐水,每4 d观察记录荷瘤小鼠局部肿瘤体积,免疫组织化学法检测瘤体组织cleaved-caspase 3和LC3-II表达水平。结果:BIIB021有促p210-T315I细胞凋亡的作用,随着药物浓度升高,细胞凋亡率越高(r=0.91)。氯喹能增强BIIB021相关的促凋亡作用,流式细胞术检测结果显示,联合用药组p210-T315I细胞凋亡率明显高于BIIB021、氯喹单用药组(P<0.05)。DAPI染色显示,与药物单用组比较,药物联合应用组细胞中点状浓染更多,细胞核碎裂更明显。凋亡和自噬相关蛋白检测显示,与对照组比较,BIIB021单药组细胞中LC3-I向LC3-II转变增加,p62减少(P<0.05)。当氯喹联合BIIB021时,与BIIB021单用相比,LC3-II和p62的表达量增多(P<0.05),此时PARP和caspase 3的激活带增多(P<0.05)。动物实验显示两种药物联合使用与药物单用相比,小鼠肿瘤体积明显变小(P<0.01)。免疫组织化学显示氯喹+BIIB021联用组肿瘤组织中cleaved-caspase 3、LC3-II表达量高于BIIB021单用组。结论:热休克蛋白90抑制剂BIIB021对T315I突变的CML细胞、小鼠模型有促进凋亡的作用,氯喹能增强这一效应,其机制可能与抑制自噬有关。
2022年04期 v.30;No.158 1005-1010页 [查看摘要][在线阅读][下载 1345K] [下载次数:189 ] |[引用频次:2 ] |[阅读次数:0 ] - 潘巍;沈燕;骆波;曹喻;
目的:探讨双氢青蒿素(DHA)对急性髓系白血病(AML)的潜在治疗价值及其作用机制。方法:通过CCK-8检测细胞活力,明确DHA对AML细胞活力的影响;通过荧光探针染色及流式细胞术检测DHA对AML细胞内氧化还原状态的影响;通过免疫印迹技术、腺病毒转染和激光共聚焦分析DHA对细胞自噬水平的影响,并利用不同小分子抑制剂进行实验,进一步探究DHA诱导AML细胞死亡的可能机制。结果:DHA可抑制AML细胞株HL-60和Kasumi-1的活力,同时可显著提高细胞内氧化应激水平,经10μmol/L DHA处理后,HL-60细胞内活性氧含量可升至原来的2.6倍,Kasumi-1细胞内活性氧含量可升至原来的2.0倍。此外,DHA还可上调AML细胞内自噬相关蛋白的表达,增加胞内自噬流,激活自噬。进一步检测发现,自噬抑制剂可降低DHA诱导的细胞死亡,而且通过清除胞内自由基抑制氧化应激水平可抑制自噬的发生进而恢复细胞活力。结论:DHA可通过诱导氧化应激激活AML细胞发生自噬性死亡。
2022年04期 v.30;No.158 1011-1017页 [查看摘要][在线阅读][下载 1342K] [下载次数:381 ] |[引用频次:3 ] |[阅读次数:0 ] - 梁艳;杨爱莹;刘敏;成延娟;臧思斌;黄俊;唐元艳;黄知平;
目的:检测急性髓系白血病患者骨髓单个核细胞中多发性骨髓瘤相关抗原(MMSA)-8、MMSA-1表达情况,探讨二者在急性髓系白血病中的临床意义。方法:纳入2019年1月-2020年1月本院M2型急性髓系白血病患者83例为研究组,同期血液科诊断为单纯缺铁性贫血患者15例为对照组,实时荧光定量PCR检测骨髓单个核细胞中MMSA-8、MMSA-1表达水平。将研究组患者根据疗效分为缓解、未缓解,根据预后状况分为预后良好、预后中等和预后不良,分析MMSA-8、MMSA-1与疗效、预后的关系。另收集研究组患者的一般资料,包括入院时血常规白细胞数、血红蛋白、血小板数和骨髓原始细胞百分比,Pearson法分析MMSA-8、MMSA-1与患者临床资料以及MMSA-8与MMSA-1的相关性。结果:对患者骨髓单个核细胞中MMSA-8、MMSA-1 mRNA水平分析结果显示,研究组患者明显高于对照组患者(P<0.05);研究组中未缓解患者明显高于缓解患者(P<0.05),预后中等、预后不良患者均明显高于预后良好患者(P<0.05),预后不良患者仅MMSA-1 mRNA水平明显高于预后中等患者(P<0.05)。Pearson法分析结果显示,研究组患者MMSA-8、MMSA-1与白细胞数呈正相关(r=0.468,r=0.516),MMSA-8与MMSA-1呈正相关(r=0.318)。结论:M2型急性髓系白血病患者骨髓单个核细胞中MMSA-8、MMSA-1水平升高,二者均与疾病发生发展关系密切,且对预后有一定预测价值。
2022年04期 v.30;No.158 1018-1021页 [查看摘要][在线阅读][下载 1041K] [下载次数:118 ] |[引用频次:1 ] |[阅读次数:0 ] - 周美;安福润;张青;董毅;秦慧;翟志敏;陶千山;
目的:探讨真实世界中急性髓系白血病(AML)首次诱导治疗后使用重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)对临床疗效和流式微小残留病变(MRD)的影响。方法:回顾性分析在安徽医科大学第二附属医院血液科初次确诊并接受首次诱导治疗的44例AML患者的临床资料,根据治疗后是否使用rhG-CSF分为对照组和治疗组,比较两组完全缓解率、中性粒细胞缺乏(粒缺)持续时间、感染发生率、发热持续时间、抗菌药物费用、住院时间、流式MRD以及无复发生存时间(RFS)等指标的差异。结果:对照组完全缓解率为60%,治疗组为74%(P=0.3429);对照组粒缺持续时间为(21.28±7.91)d,治疗组为(14.79±3.07)d(P=0.0016);对照组发热持续时间为(12.80±7.31)d,治疗组为(9.11±7.48)d(P=0.0136);对照组和治疗组感染发生率、抗菌药物费用、住院时间以及无复发生存时间等指标比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。治疗组最终获得CR的患者中在首次脱离粒缺时有66%的病例外周血流式细胞术检测到髓系前体细胞(占比2.25%±0.99%),容易被误判为流式MRD+。结论:AML首次诱导治疗后使用rhGCSF不仅不会影响临床缓解率,还能显著缩短粒缺时间和发热时间,但可能会影响首次脱离粒缺时外周血流式MRD检测结果分析。
2022年04期 v.30;No.158 1022-1027页 [查看摘要][在线阅读][下载 1180K] [下载次数:204 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] - 宗立翎;杨晶;薛胜利;吴德沛;朱霞明;葛永芹;邱桥成;
目的:针对接受诱导及巩固化疗的急性白血病患者进行包含营养风险筛查、膳食评价、血生化指标监测、人体成分分析的综合营养评估,分析化疗期间营养状况变化。方法:纳入2018年6月至2019年8月于苏州大学附属第一医院就诊的169例急性白血病患者,化疗前后分别进行NRS-2002及PG-SGA量表评估,评估化疗过程中膳食摄入量,测定患者血常规、血生化指标,监测人体成分,从多个维度比较化疗前后营养状况的变化。结果:化疗后患者NRS-2002评分、PG-SGA评分较化疗前明显升高(P<0.001);化疗期间许多患者存在营养摄入不足情况,初治化疗患者膳食摄入评分明显低于巩固化疗患者(P=0.043);多因素分析结果显示,初治诱导化疗为患者PG-SGA评分升高、膳食摄入减少的独立危险因素(均P<0.05);患者接受化疗后,白细胞计数、血红蛋白、血小板计数较化疗前明显下降(P<0.001),前白蛋白明显升高(P<0.001),血糖升高(P=0.04),白蛋白水平改变不明显;患者化疗后体重、身体质量指数、去脂体重、骨骼肌质量、细胞内水分均明显下降(P<0.001),内脏脂肪面积明显升高(P<0.05)。这一变化在初治急性淋系白血病患者中更明显。结论:急性白血病患者化疗后营养状况发生了明显变化,单一指标对营养状态评估意义有限,多种工具综合评估营养状况值得在临床中推广应用。
2022年04期 v.30;No.158 1028-1033页 [查看摘要][在线阅读][下载 1004K] [下载次数:460 ] |[引用频次:5 ] |[阅读次数:0 ] - 曹璐;高静;高伟;刘虎;卢俊;王易;何海龙;肖佩芳;李捷;李建琴;胡绍燕;
目的:探讨急性B淋巴细胞白血病患儿采用CCLG-ALL-2008方案疗程拖延对疾病复发的影响。方法:对2011年1月至2014年12月在苏州大学附属儿童医院初诊并接受CCLG-ALL-2008方案治疗的急性B淋巴细胞白血病患儿进行回顾性分析,明确化疗疗程拖延与复发的关系,并探究导致疗程拖延引起复发的原因,随访至2019年7月。结果:疗程拖延周数对复发率的影响具有统计学意义(P=0.034),风险率比提示大于4周影响显著。第12周微小残留病阳性(1×10-4≤微小残留病≤1×10-2)对复发率的影响亦有统计学意义(P=0.041)。在疗程拖延原因中,单纯骨髓抑制对复发率的影响有统计学意义(P=0.01)。结论:疗程拖延4周以上、第12周微小残留病阳性和单纯骨髓抑制是影响复发的独立预后因素。
2022年04期 v.30;No.158 1034-1039页 [查看摘要][在线阅读][下载 1094K] [下载次数:144 ] |[引用频次:1 ] |[阅读次数:0 ] - 柳梓杨;舒逸;傅国;苏虹宇;朱丹;曾腊梅;马德禹;邹琳;
目的:探讨RAS蛋白家族在维持T-ALL细胞株体外生长中的功能。方法:纯化T-ALL细胞株DNA,利用PCR法扩增3个RAS基因(KRAS、NRAS、HRAS)的编码区。经T-A克隆后,Sanger法对KRAS、NRAS、HRAS基因编码区测序。将siRNA克隆到pSEH-361载体,在HEK-293T细胞中与pAMPHO和pVSVG一起包装成逆转录病毒,随后感染T-ALL细胞。qRT-PCR和Western blot检测基因表达情况。利用Annexin V-PE/7-AAD染色T-ALL细胞,流式细胞术检测细胞凋亡情况。利用Hoechst 33258染色T-ALL细胞,流式细胞术检测细胞周期分布情况。经抗体染色,荧光显微镜观察cleaved-Caspase 3蛋白的表达。结果:在T-ALL细胞株中,除Loucy和P12-ICH细胞KRAS基因发生c. 6187G> A(p. KRASG12D)突变,其余RAS基因均未发现错义突变。除PEER细胞(IC50=47.916μmol/L)外,泛RAS抑制剂Compound 3144对其它T-ALL细胞均有一定杀伤作用。同样,除PEER细胞(IC50=94.2265μmol/L)外,Tipifarnib可诱导多种T-ALL细胞凋亡。抑制KRAS表达后,T-ALL细胞凋亡明显,细胞周期阻滞。结论:KRAS蛋白维持T-ALL细胞株体外生长,是治疗T-ALL的潜在药物靶点。
2022年04期 v.30;No.158 1040-1048页 [查看摘要][在线阅读][下载 1744K] [下载次数:189 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] - 朱瑶;刘海燕;相燕;杨晖;姚新原;安曦洲;张凯楠;黄兰;梁绍燕;于洁;
目的:探讨Netrin-1对急性T淋巴细胞白血病(T Cell Acute Lymphoblastic Leukemia,T-ALL)细胞中VEGFA水平的影响及可能的作用机制。方法:采用ELISA法检测10例T-ALL患儿和23例非恶性血液系统疾病患儿骨髓中Netrin-1、VEGFA的水平并进行比较,分析疾病组和对照组患儿骨髓中Netrin-1与VEGFA水平的相关性。体外培养T-ALL细胞株Jurkat、Molt-4,用不同浓度的Netrin-1(0,25,50,100 ng/ml)处理细胞24 h后,qRT-PCR及Western blot检测不同浓度下各细胞中VEGFA的表达量;qRT-PCR检测两种细胞中Netrin-1受体的表达,并采用co-IP检测Netrin-1与T-ALL细胞中受体的结合;Western blot检测各组细胞中Akt-mTOR通路中关键蛋白的磷酸化水平。使用Akt/mTOR抑制剂与Netrin-1(100 ng/ml)联合处理T-ALL细胞后,采用Western blot检测各组细胞中VEGFA的表达量以及Akt/mTOR通路中关键分子的磷酸化水平。结果:T-ALL患儿骨髓中Netrin-1及VEGFA表达水平显著高于对照组(P<0.05),且在T-ALL患者中两者表达水平呈线性相关(r2=0.974)。随着Netrin-1浓度的升高,VEGFA的表达水平也升高(P<0.05)。当Netrin-1浓度为100 ng/ml时,Netrin-1与Integrin-β4受体结合。Netrin-1浓度为100 ng/ml处理细胞24 h后,Akt、mTOR通路关键分子的磷酸化水平均提高;当Netrin-1(100 ng/ml)与Akt抑制剂联合处理T-ALL细胞后,VEGFA的表达量下降,Akt、mTOR的磷酸化水平也下降;而与mTOR抑制剂联合处理细胞后,Akt的磷酸化水平升高,mTOR的磷酸化水平降低,VEGFA的表达量也下降。结论:T-ALL患儿骨髓中Netrin-1及VEGFA表达量存在异常且两者存在线性关系;Netrin-1通过Integrin-β4受体,激活Akt/mTOR通路诱导T-ALL细胞表达VEGFA。
2022年04期 v.30;No.158 1049-1055页 [查看摘要][在线阅读][下载 1291K] [下载次数:154 ] |[引用频次:1 ] |[阅读次数:0 ] - 彭志元;杨春秀;伞景辉;李清群;张敏敏;石彬;
目的:观察急性髓细胞白血病(AML)患者外周血辅助性T细胞17(Th17)和白细胞介素23(IL-23)的表达,分析外周血Th17、IL-23与免疫表型的关系。方法:前瞻性选择2019年1月-2021年1月医院105例AML患者作为研究对象,经流式细胞术检测AML患者外周血Th17、IL-23的表达,检测并统计AML患者免疫表型;分析AML患者外周血Th17、IL-23表达与免疫表型的关系。绘制ROC曲线,分析外周血Th17、IL-23表达对免疫表型的预测价值。结果:AML患者免疫表型检测结果显示,105例AML患者髓系抗原、淋系抗原、造血干/祖细胞标记抗原均有多种抗原呈阳性表达,髓系抗原中,CD13+占比最高(93.33%),淋系抗原中,CD56+占比最高(32.38%),造血干/祖细胞标记抗原中,CD38+占比最高(68.57%)。CD56+、CD7+、CD34+、人类白细胞抗原DR+(HLA-DR+)的AML患者外周血Th17表达高于CD56-、CD7-、CD34-、HLA-DR-的患者,CD56+、CD34+、HLA-DR+的AML患者外周血IL-23表达高于CD56-、CD34-、HLA-DR-的患者,差异有统计学意义(P<0.05);其他抗体阳性与阴性患者外周血Th17、IL-23表达比较差异无统计学意义(P> 0.05)。经Logistic回归分析显示,AML患者外周血Th17高表达与免疫表型检查中CD56、CD7、CD34、HLA-DR阳性表达有关,IL-23高表达与免疫表型检查中CD56、CD34、HLA-DR阳性表达有关。绘制ROC曲线发现,外周血Th17、IL-23表达水平单独及联合预测CD56+、CD34+、HLADR+的AUC及外周血Th17预测CD7+的AUC多数在0.5-0.7,有一定预测价值,但预测性能较低。结论:AML患者髓系抗原、淋系抗原、造血干/祖细胞标记抗原均有多种抗原呈阳性表达,AML患者外周血Th17高表达与免疫表型检查中CD56、CD7、CD34、HLA-DR阳性表达有关,IL-23高表达与免疫表型检查中CD56、CD34、HLA-DR阳性表达有关。
2022年04期 v.30;No.158 1056-1062页 [查看摘要][在线阅读][下载 1139K] [下载次数:154 ] |[引用频次:2 ] |[阅读次数:0 ] - 栾松华;马彦青;杨晶晶;王昊;刘代红;窦立萍;
目的:基于大样本数据分析FOSB表达量与急性髓系白血病患者预后的关系。方法:对多个公共数据库中基因组、转录组、基因芯片及临床信息进行统计分析。结果:急性髓系白血病患者FOSB基因表达量较健康人明显升高。163例急性髓系白血病患者预后分析提示,FOSB高表达患者表现出更长的OS及EFS(P=0.02,P=0.035)。根据治疗方式进一步将患者分为化疗组和异基因造血干细胞移植组,每组根据FOSB的表达水平中位值再分为FOSB高表达、FOSB低表达组,并进行生存分析。在移植组中,FOSB高表达患者较低表达患者有更长的无事件生存期(EFS:P=0.017)和总生存期(OS:P=0.029)。同时在163例患者中,FOSB高表达组患者进行异基因造血干细胞移植可提高该类患者预后(ChemotherapyvsAllo-HSCT,OS:P<0.001,EFS:P=0.007)。多因素分析表明,FOSB高表达是EFS和OS的独立有利预后因素(EFS:HR=0.501,P=0.019;OS:HR=0.461,P=0.009)。结论:FOSB的高表达提示急性髓系白血病患者良好的预后。
2022年04期 v.30;No.158 1063-1070页 [查看摘要][在线阅读][下载 1413K] [下载次数:246 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] - 潘静;张园园;焦霞霞;宋蕾娜;林彩芹;王素丽;朱斌;潘韶英;丁志勇;赵文理;
目的:探讨CD47分子在初诊成人急性髓系白血病(AML)患者中的表达及其与临床预后的相关性。方法:选择2020年4月-2021年10月上海市奉贤区中心医院诊断明确的AML患者20例,另5例非恶性血液病患者作为对照组。实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)检测骨髓、外周血单个核细胞CD47的表达。结合患者初诊时血象、骨髓涂片、流式细胞术、染色体及基因检测、ECOG评分等情况,评价患者预后与CD47表达的关系。结果:与对照组比较,初诊AML患者骨髓(P=0.0115)及外周血单个核细胞(P=0.0069)中CD47表达明显升高。在骨髓单个核细胞中,CD47高表达患者总的生存时间短于CD47低表达患者(P=0.036),不同危险分层患者的生存率差异有统计学意义(P=0.012),但在外周血单个核细胞中CD47表达高、低的患者生存时间比较差异无统计学意义(P=0.116)。骨髓单个核细胞CD47表达高低组在白血病相关基因突变、存在融合基因、CD34+、CD38+、CD123+表达等方面均无统计学意义(P> 0.05)。AML患者骨髓原始细胞数比例> 50%、ECOG评分> 2分、存在MLLELL融合基因、染色体预后分层均为影响患者生存的危险因素(P分别为0.023、0.036、0.012、0.001)。AML患者骨髓高表达CD47提示疾病高复发风险(P=0.017)。结论:骨髓单个核细胞CD47在AML患者中表达升高,提示更差的生存和更高的复发风险。
2022年04期 v.30;No.158 1071-1078页 [查看摘要][在线阅读][下载 1364K] [下载次数:126 ] |[引用频次:3 ] |[阅读次数:0 ] - 林少汾;侯乐乐;王健;许吕宏;刘勇;麦友刚;方建培;周敦华;
目的:探讨儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)化疗后骨髓抑制期并发卡氏肺孢子虫肺炎(PCP)的临床特点和治疗对策,为临床医生进行早期诊断和有效治疗提供参考。方法:回顾性分析5例儿童ALL化疗后粒细胞缺乏期发生PCP的临床表现、实验室检查、影像学结果以及治疗和转归。结果:5例患儿男女比例为1∶4,中位年龄5.5(2.9-8)岁。5例患儿均为诱导缓解化疗后粒细胞缺乏期间出现PCP,临床表现缺乏特异性,主要表现为高热、气促、呼吸费力,咳嗽不剧烈,2例出现肺部湿啰音,3例双肺无啰音。实验室检查结果提示,C反应蛋白(CRP)、血清降钙素原(PCT)、(1,3)-β-D-葡聚糖(BDG)、乳酸脱氢酶(LDH)以及炎症因子IL-2R、IL-6、IL-8均升高;胸部CT表现为双肺弥漫多发斑片状密度增高影;均通过高通量测序技术在肺泡灌洗液或深部痰中检出卡氏肺孢子虫。所有患儿疑诊PCP即停化疗,并予复方磺胺甲恶唑片联合卡泊芬净抗卡氏肺孢子虫治疗和甲基强的松龙抗炎,同时予粒细胞刺激因子、丙种球蛋白等支持治疗;期间所有儿童均因呼吸窘迫转入PICU,予无创或有创机械通气治疗。4例患儿治愈,1例患儿死亡。结论:ALL患儿出现高热、呼吸困难、LDH及BDG升高,肺部弥漫斑片影或实变时,应高度怀疑PCP,尽快完善呼吸道标本的病原体检测。TMP/SMZ是抗PCP的一线用药,卡泊芬净静滴联合TMP/SMZ口服治疗NH-PCP可能有更好的疗效,糖皮质激素辅助治疗中重度NH-PCP可能使患者获益。
2022年04期 v.30;No.158 1079-1085页 [查看摘要][在线阅读][下载 1131K] [下载次数:264 ] |[引用频次:1 ] |[阅读次数:0 ] - 吴秀继;王永卿;杨晓阳;林学姝;邱梅花;
目的:分析急性期蛋白(APPs)对急性髓系白血病(AML)患者预后的预测价值。方法:收集2015年1月-2021年4月符合研究要求的293例AML患者,随访并调查其临床特征和治疗前APP[包括白蛋白(ALB)、纤维蛋白原(FIB)、C-反应蛋白(CRP)、铁蛋白(FER)]。使用Pearson相关系数分析APP间的相关性,使用Logistic回归分析AML患者死亡的危险因素,使用ROC曲线分析APP对AML患者死亡的预测价值,使用Kaplan-Meier生存分析比较APP对AML患者的缓解(CR)率、总体生存期(OS)、无病生存期(DFS)、无进展生存期(PFS)的影响。结果:相关性分析结果显示,ALB与CRP(r=-0.134,P=0.002)和FER(r=-0.148,P=0.001)间存在一定的负相关关系。FER与CRP(r=0.361,P<0.001)和FIB(r=0.293,P<0.001)间存在相关关系。Logistic回归分析显示,高龄(> 50岁)(OR=1.87,95%CI=1.25-2.15,P<0.001)、治疗后复发(OR=2.11,95%CI=1.11-3.18,P=0.003)、FLT3-ITD变异(OR=2.59,95%CI=1.10-4.12,P<0.001)、CRP≥5.24 mg/L(OR=1.21,95%CI=1.02-2.14,P=0.024)、CFA(CFA=CRP*FIB/ALB)≥3(OR=2.41,95%CI=1.65-6.47,P<0.001)、FER≥1145.58mg/ml(OR=1.67,95%CI=1.15-3.75,P<0.001)为AML患者生存的危险因素。ROC曲线分析显示,FER(AUC=0.752,95%CI=0.681-0.823,P<0.001,最佳切点=1220.56 mg/ml)和CFA(AUC=0.804,95%CI=0.741-0.868,P<0.001,最佳切点=3.00)对AML患者生存预测价值较高。低CFA组(CFA≤3)的CR率、PFS、DFS、OS均显著高于高CFA组(CFA> 3),而总体死亡率低于高CFA组;低FER组(FER≤1220.56 mg/ml)的CR率、PFS、DFS、OS均显著高于高FER组(FER> 1220.56 mg/ml),而总体死亡率低于高FER组,差异具有统计学意义。结论:AML患者治疗前的CFA值和FER水平可独立预测患者的预后,高水平的CFA和FER与AML患者预后不良相关。
2022年04期 v.30;No.158 1086-1093页 [查看摘要][在线阅读][下载 1262K] [下载次数:143 ] |[引用频次:2 ] |[阅读次数:0 ]
- 陈雪瑜;闫雪;宋滨阳;孙健;慕俐君;李伟平;
目的:探讨BET抑制剂JQ1对于双表达B细胞淋巴瘤细胞株的作用机制。方法:Western blot检测B细胞淋巴瘤细胞株SU-DHL6、OCILY3、OCILY10的c Myc和BCL-2蛋白的表达情况,识别双表达淋巴瘤细胞株。CCK-8方法检测JQ1对淋巴瘤细胞株增殖的影响,Western blot及RT-RCR方法检测JQ1对c Myc、BCL-2、BCL-6 mRNA及蛋白水平的影响,流式细胞术检测JQ1对淋巴瘤细胞株凋亡的影响。结果:SU-DHL6、OCILY3同时表达c Myc和BCL-2,为双表达淋巴瘤细胞株。CCK-8结果显示,JQ1对双表达淋巴瘤细胞株的增殖有抑制作用,并且JQ1主要调节c Myc、BCL-6的表达,对BCL-2无明显影响,且对B淋巴瘤细胞株凋亡无影响。结论:BET抑制剂JQ1可调节c Myc、BCL-6表达,抑制B细胞淋巴瘤增殖。
2022年04期 v.30;No.158 1094-1100页 [查看摘要][在线阅读][下载 1501K] [下载次数:148 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] - 张钧栋;张皓旻;卢迪;王紫宁;陈浩然;卢学春;
目的:筛选弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)自噬相关基因(ARG)的差异表达,探讨差异表达自噬基因(DEARG)在DLBCL发生发展中的作用机制并建立预后模型。方法:利用包含481例DLBCL患者临床信息及基因表达谱数据的NCICCR数据库与包含232个ARG的HADb数据库,通过R语言确定DLBCL中ARG的差异表达,GO和KEGG分析ARG与DLBCL发生发展的关系,Cox回归算法建立多基因预后模型,Kaplan-Meier方法绘制生存曲线,ROC曲线评价预后模型的可靠性。结果:从481例DLBCL患者淋巴结样本及5例正常淋巴结样本中共提取DEARG122个,其中上调基因4个,下调基因118个。GO富集主要集中在线粒体自噬、自噬调节、细胞对外部刺激的反应等本体学注释。KEGG富集主要集中在细胞衰老、NOD样受体信号通路、PI3K-Akt信号通路、PD-1/PD-L1信号通路等。对230个临床信息完整的样本进行生存分析,单因素Cox分析发现20个ARG与DLBCL患者整体生存明显相关,多因素Cox回归筛选出9个预后相关ARG(HIF1A、CAPN1、ITPR1、PRKCQ、TRAIL、HDAC1、TSC2、NRG3和MAPK3)建立DLBCL ARG预后模型。Kaplan-Meier生存曲线分析显示,高、低风险组患者的生存率比较具有显著差异(P<0.001)。多因素Cox回归分析结果表明,国际预后指数和风险值是DLBCL患者的独立预后指标(P<0.05),ROC曲线下面积分别为0.762和0.747。结论:DLBCL ARG预后模型可用于预测患者的预后,但仍需大样本的临床研究加以证实。
2022年04期 v.30;No.158 1101-1108页 [查看摘要][在线阅读][下载 1782K] [下载次数:208 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] - 冯娟;唐海龙;原瑞凤;徐莉;郑焱华;梁蓉;白庆咸;张涛;杨岚;顾宏涛;高广勋;
目的:评价系统性间变大细胞淋巴瘤(sALCL)患者的临床特征、治疗及预后。方法:回顾性分析2018年11月至2021年10月空军军医大学西京医院血液内科收治的90例sALCL患者的临床资料,总结其临床特点、治疗及预后,并探讨预后影响因素。结果:90例sALCL患者中男性58例,女性32例,中位年龄32(12-73)岁。69例(76.7%)患者发病时Ann Arbor分期为Ⅲ-Ⅳ期,半数患者有结外病变。ALK+患者60例,中位年龄27(12-72)岁,ALK-患者30例,中位年龄53(15-73)岁,两组的发病年龄有显著统计学差异(P<0.001)。88例患者接受标准一线化疗,50例(56.8%)患者达完全缓解(CR)。IPI评分≥3分是影响一线化疗后CR的独立危险因素。本组患者中位无进展生存(PFS)及中位总生存(OS)未达到。多因素分析结果显示,一线化疗后未达CR是PFS及OS的独立不良预后因素。结论:sALCL以男性居多,诊断时多处于进展期,50%患者合并结外病变。一线化疗后CR率为56.8%,IPI≥3分是一线化疗后CR的不良影响因素。一线化疗后未达CR是PFS及OS的不良预后因素。
2022年04期 v.30;No.158 1109-1115页 [查看摘要][在线阅读][下载 1051K] [下载次数:169 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] - 胡泉泉;王会平;顾康生;翟志敏;李延莉;
目的:探讨弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)患者外周血单核细胞亚群变化及临床意义。方法:采用流式细胞术检测82例DLBCL患者(包括32例初诊、29例缓解以及21例复发)和30例健康对照者外周血单核细胞亚群百分比,并分析其与DLBCL患者临床特征的相关性及其诊断价值。结果:与健康对照组相比,DLBCL初诊组患者中间型单核细胞亚群占总单核细胞比例明显升高(t=5.888,P<0.01)。DLBCL复发组患者中间型单核细胞亚群所占比例明显高于初诊组(t=2.106,P=0.04)和缓解组(t=6.882,P<0.01),并且初诊组患者中间型单核细胞亚群比例高于缓解组(t=3.969,P<0.01)。随着国际预后指数(IPI)评分的升高,DLBCL患者的中间型单核细胞亚型百分比增多(r=0.37)。当截点值为中间型单核细胞比例10.91%时,整体样本作为早期诊断指标的灵敏度和特异度分别为90.60%和91.00%。结论:DLBCL患者疾病进展与中间型单核细胞增多相关,可作为DLBCL潜在的诊断指标。
2022年04期 v.30;No.158 1116-1122页 [查看摘要][在线阅读][下载 1289K] [下载次数:171 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] - 孙洁;何莎;荣超;岑洪;谭晓虹;
目的:探讨局限期(Ann Arbor I期或II期)套细胞淋巴瘤(MCL)患者的临床特征、预后相关因素和治疗结果。方法:回顾性收集2005年1月至2020年6月在广西医科大学附属肿瘤医院确诊的47例初治I期和II期MCL患者的临床病理资料,分析患者的治疗结果以及预后影响因素。结果:患者中位年龄为62(37-78)岁;男性占76.6%(36例)。35例(74.5%)患者诊断时为II期,28例(59.6%)患者为MIPI评分低危组。接受治疗并可评价的患者一线治疗接受了利妥昔单抗联合化疗、单纯化疗、含阿糖胞苷方案化疗或化疗联合局部放疗,各方案组患者完全缓解(CR)率的差异无统计学意义(P> 0.05)。中位随访时间81.5个月,5年无进展生存(PFS)和总生存(OS)率分别为37.4%和80.6%。多因素分析结果发现,Ki-67> 30%是影响患者PFS和OS的独立不良预后因素(P<0.05)。结论:局限期的MCL极少见,预后较III-IV期MCL好。本研究中Ki-67≤30%的局限期MCL患者具有较好的PFS和OS。
2022年04期 v.30;No.158 1123-1128页 [查看摘要][在线阅读][下载 1138K] [下载次数:119 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ]
- 王楠;樊珂珂;袁丽君;金红实;王莉莉;
目的:探讨改良多发性骨髓瘤(MM)患者的染色体核型检测的培养方法,进一步提高MM患者的细胞遗传学异常检出率,为MM患者的临床诊断、预后分层和个体化治疗提供更准确的参考依据。方法:将80例初治的MM患者分为两组,观察组培养基中添加白介素6(10 ng/ml)和粒-单细胞集落刺激因子(30 ng/ml),对照组未加刺激因子。两组相同条件下培养72 h,G显带方法进行染色体核型分析,比较两组的异常核型检出率以及检出的细胞遗传学异常的特点。结果:观察组较对照组MM的核型异常检出率有了极大的提高,两组总体异常检出率分别为72.5%和22.5%,在≤60岁组两组异常检出率分别为80.0%和19.2%,>60岁组分别为68.0%和28.6%,比较差异均有显著统计学意义(P<0.05)。结论:添加白介素6(10 ng/ml)和粒-单细胞集落刺激因子(30 ng/ml)双刺激因子,培养72 h的改良培养法可有效地提高MM患者染色体异常核型检出率。
2022年04期 v.30;No.158 1129-1133页 [查看摘要][在线阅读][下载 1027K] [下载次数:70 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] - 张平平;张凤;
目的:探讨多发性骨髓瘤患者血清中血管内皮生长因子(VEGF)的表达水平及其可能的临床意义。方法:收集2019年7月至2020年6月蚌埠医学院第一附属医院收治的68例多发性骨髓瘤患者,使用VEGF酶联免疫吸附试剂测定VEGF的表达水平,探讨其表达水平与浆膜腔积液的关系,并分析VEGF表达水平与多发性骨髓瘤患者临床特征及预后的关系。结果:68例多发性骨髓瘤患者中VEGF阳性率为36.76%(25/68);17例浆膜腔积液阳性患者中有10例(58.82%,10/17)患者VEGF阳性。浆膜腔积液阳性患者VEGF表达水平显著高于浆膜腔积液阴性患者(P<0.05);VEGF在多发性骨髓瘤患者初诊未治组表达水平明显高于治疗后缓解组(P<0.05),而与难治/复发多发性骨髓瘤患者VEGF表达水平之间差异无统计学意义(P>0.05)。68例多发性骨髓瘤患者中有48例进行了FISH检查,28例核型正常(58.33%),20例出现异常核型(41.67%),异常核型以IgH重排为主,共10例(20.83%),其他1q21+、del(13q14)、del(17p13)分别为3例(6.25%)、2例(4.17%)、7例(14.58%)。与VEGF-组比较,VEGF+组IgH重排及del(17p13)发生率较高[IgH重排:35%vs 10.71%,P=0.043;del(17p13):30%vs 3.57%,P=0.011]。与浆膜腔积液阴性组比较,浆膜腔积液阳性组del(17p13)发生率较高(31.25%vs 6.25%,P=0.021)。VEGF与浆膜腔积液均阳性者占比为14.71%(10/68),均阴性者占比为52.94%(36/68),浆膜腔积液与VEGF表达有相关性(r=0.264,P=0.029)。结论:合并浆膜腔积液的多发性骨髓瘤患者预后不良,这部分患者血清中VEGF显著高表达,升高的VEGF可能参与浆膜腔积液的发生和发展。
2022年04期 v.30;No.158 1134-1138页 [查看摘要][在线阅读][下载 1028K] [下载次数:155 ] |[引用频次:2 ] |[阅读次数:0 ] - 陈慧玲;马成成;柴晔;曾鹏云;吴重阳;岳玲玲;韩悌云;张德奎;
目的:基于硼替佐米治疗反应及骨髓瘤细胞BTK表达水平建立非初治多发性骨髓瘤(MM)临床预测模型的列线图(nomogram)。方法:运用Oncomine数据库搜索BTK基因表达水平、性别、年龄、白蛋白水平、Mayo评分、硼替佐米治疗反应、随访时间及生存状态等信息,计算影响MM临床预后的BTK表达水平截断值(cut-off值),对上述因素进行Cox多因素回归分析,并根据独立预后因素制作列线图,用一致性指数(C-index)和校正曲线确定列线图的预测精度和判别能力。结果:多因素分析结果显示,影响患者预后的因素有硼替佐米治疗反应、BTK表达水平及性别,根据上述指标制作的列线图一致性指数为0.729(95%CI,0.642-0.8164),患者1年及2年的生存率的校正曲线与实际观测结果吻合较好。结论:基于BTK表达水平及硼替佐米治疗反应的列线图能准确地预测MM患者的预后。
2022年04期 v.30;No.158 1139-1143页 [查看摘要][在线阅读][下载 1076K] [下载次数:237 ] |[引用频次:3 ] |[阅读次数:0 ] - 陈婷;吉佳梅;李雅婷;范磊;陈丽娟;李建勇;屈晓燕;
目的:分析多发性骨髓瘤(MM)早期复发患者的临床特征。方法:纳入50例早期复发(≤12个月)MM患者,另50例晚期复发MM(> 12个月)作为对照组。回顾性分析这100例MM患者从诊断到复发的时间及相关临床资料,并确定与早期复发相关的因素。Kaplan-Meier曲线分析整个队列的总生存(OS)时间。应用曲线下面积(AUC)评估循环浆细胞对早期复发的影响。结果:高危细胞遗传学(FISH)(P=0.005)、ISS分期III期(P=0.008)与早期复发相关。对于早期疾病复发的患者,高危FISH在单变量分析中显示出较差的生存结果,并且与晚期复发患者相比,早期复发患者的染色体核型多数出现数量和结构上的异常。循环浆细胞在早期复发组患者中的表达显著增高(P=0.0318)。早期复发组患者对初始治疗的反应较差(P=0.001),预后也显著差于晚期复发的患者(中位OS为38vs81个月,P=0.002)。结论:早期复发是MM患者不良预后的标志,此类患者应重点关注,以改善其预后。
2022年04期 v.30;No.158 1144-1149页 [查看摘要][在线阅读][下载 1258K] [下载次数:225 ] |[引用频次:1 ] |[阅读次数:0 ] - 王洋;薛燕;付春梅;冯凯;李晓林;段雅雅;张慈现;杨宇娟;石浩;付杰;蒙延娜;王晖;
目的:探讨倾向性评分匹配(PSM)评估来那度胺、硼替佐米及地塞米松(RVD)方案序贯自体造血干细胞移植(Auto-HSCT)治疗多发性骨髓瘤(MM)的临床效果。方法:回顾性分析2015年1月-2021年1月本院收治的采用RVD方案治疗且已完成36个月随访的49例MM患者临床资料,纳入对照组;收集同期本医院收治的采用RVD方案序贯Auto-HSCT方案治疗且已完成36个月随访的54例MM患者临床资料,纳入观察组。运用PSM法(1∶1,卡钳值=0.01)基于基线资料及实验室指标将对照组与观察组配对,获得组间协变量均衡样本(两组各40例)。比较两组患者治疗18周后的临床疗效、治疗期间的毒副反应发生率及随访36个月的生存状况。结果:观察组的ORR、DCR均明显高于对照组(P<0.05)。两组患者的疲乏、皮疹、血小板减少、贫血、恶心等发生率比较,差异无统计学意义(P> 0.05)。随访36个月(随访期间无失访),观察组病死4例,生存率为90%,平均生存时间35.61(95%CI:35.541-35.685)个月,对照组病死10例,生存率为75%,平均生存时间34.70(95%CI:34.559-34.832)个月,观察组生存率明显高于对照组(P<0.05)。结论:RVD方案序贯Auto-HSCT治疗MM可以提高近期疗效,提高患者的生存率,且不增加毒副反应,安全性较好。
2022年04期 v.30;No.158 1150-1155页 [查看摘要][在线阅读][下载 1073K] [下载次数:139 ] |[引用频次:1 ] |[阅读次数:0 ] - 陈婷;李历程;张燕;马丹;王季石;李梦醒;
目的:初步探讨褪黑素(melatonin,MLT)对人多发性骨髓瘤细胞株RPMI 8226增殖、凋亡的影响及其可能的机制。方法:体外培养RPMI 8226细胞,不同浓度的MLT作用于RPMI 8226细胞,CCK-8法、甲基纤维素克隆实验检测MLT对细胞增殖的作用,Annexinv-FITC/PI、流式细胞术检测MLT对细胞凋亡的影响,Western blot检测细胞中凋亡蛋白及内质网应激相关蛋白的表达,CCK-8法检测MLT与硼替佐米(Bortezomib,BTZ)联合使用对RPMI8226细胞活力的影响。结果:与对照组比较,MLT组细胞活力明显降低,呈药物剂量和时间依赖性(r=-0.9777,r=-0.9951),克隆形成数目减少,细胞凋亡增加(P<0.05),抗凋亡蛋白XIAP表达降低,凋亡蛋白Bax、Caspase3表达升高,内质网应激相关蛋白表达升高。与单独BTZ组比较,MLT与BTZ联合组RPMI 8226细胞的存活率明显降低(P<0.01)。结论:MLT可抑制骨髓瘤RPMI 8226细胞增殖,促进RPMI 8226细胞凋亡,增强BTZ对RPMI8226细胞抗肿瘤作用,其机制可能与内质网应激有关。
2022年04期 v.30;No.158 1156-1161页 [查看摘要][在线阅读][下载 1326K] [下载次数:203 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] - 陈明真;张学亚;王美娥;黄荣富;范春梅;
目的:探讨多发性骨髓瘤(MM)患者血脂指标水平及其预后意义。方法:选取2012年1月至2021年4月我院初诊MM患者87例及健康体检对照者87例。比对MM患者与健康对照者血脂水平;分析性别、年龄、血红蛋白(Hb)、白蛋白(ALB)、血小板(PLT)、β2-微球蛋白(β2-MG)、骨髓浆细胞比例(BMPC)两分组间、不同免疫分型、ISS分期及化疗前后患者血脂水平差异;单因素及COX多因素回归分析血脂指标等临床参数对MM预后的影响。结果:MM患者血清总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、载脂蛋白A1(Apo A1)、载脂蛋白B(Apo B)水平均明显低于健康对照者(P<0.05)。患者贫血、低蛋白、低PLT与低胆固醇有关,低Hb、ALB者TC、LDL-C、HDL-C、Apo A1、Apo B水平均明显低于高Hb、ALB者(P<0.05),低PLT者Apo B水平明显低于高PLT者(P<0.05)。TC、LDL-C、HDL-C、Apo A1、Apo B水平在不同免疫分型患者间差异有统计学意义,IgA型上述指标明显低于IgG型(P<0.05),IgG型明显低于轻链型(P<0.05),双克隆型明显低于轻链型(P<0.05)。TC、LDL-C、Apo B水平在不同ISS分期患者间差异有统计学意义,Ⅱ期低于Ⅰ期(P> 0.05),Ⅲ期均明显低于Ⅱ、Ⅰ期(P<0.05)。化疗后患者TC、TG、LDL-C、HDL-C、Apo A1、Apo B水平均明显高于化疗前(P<0.05)。单因素分析结果显示,Hb、PLT、β2-MG、BMPC、LDL-C、Apo B影响MM预后;多因素分析结果显示,BMPC、Apo B是MM预后的独立影响因素。结论:MM患者血清胆固醇水平降低,且低胆固醇血症与疾病分型分期有关,随着疾病好转,血清胆固醇水平升高,低血清Apo B水平预示较差的预后。
2022年04期 v.30;No.158 1162-1169页 [查看摘要][在线阅读][下载 1183K] [下载次数:371 ] |[引用频次:7 ] |[阅读次数:0 ]
- 黄豪博;范丽萍;林秋燕;黄惠炆;付丹晖;
目的:探讨不同储存时间去白细胞悬浮红细胞(LDRCS)中外泌体(exosome,Exo)的释放及其对血液肿瘤细胞增殖的调控与可能机制。方法:应用超高速离心方法获得不同储存时间的LDRCS中Exo(RBC-Exo),采用透射电镜术、蛋白免疫印迹法分别对RBC-Exo的形态、免疫标记进行检测。采用动态光散射检测不同储存时间LDRCS中RBC-Exo的粒径分布变化。采用CCK-8法检测RBC-Exo对血液肿瘤细胞增殖的影响。采用蛋白免疫印迹法检测与RBC-Exo共培养后血液肿瘤细胞内增殖相关蛋白的表达变化。结果:分离出呈类杯状、粒径分布于20-200 nm、CD63/TSG101富集、Calnexin阴性、CD235a阳性、CD41阴性的RBC-Exo。储存中晚期(> 14 d)LDRCS中RBC-Exo粒径分布无显著差异,但显著大于储存早期(储存≤14 d)的RBC-Exo。与对照组相比,RBC-Exo可以明显促进血液肿瘤细胞HBL1、U2932和Jurkat的增殖。与RBC-Exo共培养3 d的HBL1、U2932和Jurkat细胞中周期相关蛋白P21的表达较对照组明显下调,而抗凋亡蛋白BCL-2并无明显变化。结论:储存中晚期的LDRCS中RBCExo形态与储存早期存在差异。RBC-Exo可以促进血液肿瘤细胞的增殖,其机制可能是通过调节周期相关蛋白P21的表达。
2022年04期 v.30;No.158 1188-1192页 [查看摘要][在线阅读][下载 1196K] [下载次数:190 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] - 黄惠妮;莫柱宁;廖湘成;阳子骥;韦月荣;朱春丽;黎海澜;
目的:利用ABO血型基因分型技术协助临床血清学疑难血型的鉴定。方法:收集2021年1月-2021年8月本院用血清学鉴定ABO正反定型不符的疑难血型标本10例,采用基因测序方法检测ABO基因型。结果:10例疑难血型标本的ABO基因型分别为A102/Bw11、A102/Bw12、O02/O02、A102/B303、A102/B101、Bw11/O02、B101/O04、Bw11/O01、Bw11/O01、A101/O02。其中有6例标本血型基因测序结果和血清学表型一致,其他4例标本的血清学表型和基因测序结果均表现出一定的差异。结论:鉴定ABO疑难血型可利用基因分型技术结合血清学方法,最终准确鉴定血型,更好的保障输血安全。
2022年04期 v.30;No.158 1193-1197页 [查看摘要][在线阅读][下载 1132K] [下载次数:307 ] |[引用频次:7 ] |[阅读次数:0 ] - 宋婕;陈李影慧;刘爱萍;王书亚;吕先萍;
目的:探讨低浓度二硫苏糖醇(DTT)去除CD38单抗对输血相容性检测干扰的有效性和安全性,制定合理的临床输血策略。方法:按照标准方法进行血型表型、直接抗人球蛋白试验及抗体筛查,分别用0.2、0.1、0.05、0.02、0.01和0.005 mol/L的DTT处理抗筛细胞及供者红细胞,用抗人球蛋白卡式法对CD38单抗治疗后血清进行抗体筛查及交叉配血。结果:DTT 0.01 mol/L 37℃处理检测红细胞30 min可以去除CD38单抗对抗体筛查及交叉配血的影响,同时保留其对抗-K、抗-LW、抗-JMH、抗-Lu~b、抗-e、抗-Di~a及抗-Jk~a同种抗体检测的有效性。10例患者红细胞输注后均未发生急性或迟发性溶血性输血反应,血常规检测显示红细胞输注有效。结论:0.01 mol/L DTT在去除CD38单抗对输血相容性检测干扰的同时保留了对大多数同种抗体的检测能力,该方法安全有效。
2022年04期 v.30;No.158 1198-1202页 [查看摘要][在线阅读][下载 1040K] [下载次数:140 ] |[引用频次:1 ] |[阅读次数:0 ] - 高晓云;寇立舵;田华;王新华;
目的:探讨恶性血液病患者血小板HLA-Ⅰ抗体产生与HLA-A、B基因之间的相关性和血小板HLA-Ⅰ抗体产生的易感基因。方法:选择本院血液科需多次输注血小板治疗的恶性血液病患者作为研究对象,采用ELISA法对患者进行HLA-I类抗体检测,根据抗体检测结果将患者分为抗体阳性组和抗体阴性组,提取患者基因组DNA后进行HLA-A、B基因测序,比较两组之间HLA-A、B基因频率的差异。结果:患者HLA-I类抗体阳性率为22.95%。对100例研究对象进行HLA-A、B基因测序,共获得HLA-A等位基因13个,HLA-B等位基因14个,其中HLA-A*24、HLA-A*30、HLA-B*13等位基因频率在抗体阳性组与阴性组之间存在统计学差异(P<0.05)。抗体阳性组HLA-A*30、HLA-B*13等位基因频率低于抗体阴性组(RR=0.107,0.387),HLA-A*24等位基因频率高于抗体阴性组(RR=1.412)。HLA-A*24、HLA-A*30、HLA-B*13基因高分辨基因分型显示等位基因HLA-A*24∶02、HLA-A*30∶01、HLA-B*13∶02在抗体阳性组和阴性组间存在差异,RR值分别为1.412、0.107、0.125,95%CI分别为0.961-2.075、0.016-0.721、0.300-0.515。结论:恶性血液病患者HLA-A*24∶02等位基因可能是血小板HLA-Ⅰ抗体产生的易感基因,而HLA-A*30∶01、HLA-B*13∶02等位基因可能是保护基因。
2022年04期 v.30;No.158 1203-1207页 [查看摘要][在线阅读][下载 1010K] [下载次数:158 ] |[引用频次:3 ] |[阅读次数:0 ] - 丁琴丽;刘爱飞;邱芳;
目的:对1对龙凤胎中的弟弟出现正定型呈混合凝集的ABO正反定型不符样本进行鉴定,探讨血清学方法和基因测序在先天性血型嵌合体中的应用。方法:采用微柱凝胶法进行ABO血型鉴定、Rh和MN分型和PCR-SSP法进行ABO基因分型。结果:该患儿ABO正定型为抗A和抗B两管均有红细胞混合凝集,反定型为AB型;患儿的Rh分型为CcDEe;MN分型中的抗M和抗N两管均有红细胞混合凝集。患儿的父亲和母亲分别为正常O型和AB型。患儿本人ABO基因存在O0101、A102和B01 3个等位基因,O0101来自父亲,A102和B01来自母亲。结论:该名患儿体内存在A型和B型两群红细胞,由于患儿为双卵双生,这两群红细胞应该是异卵双生子之间进行了血液交换所形成的嵌合体。通过基因测序可判定该患儿是一名先天性A/B血型嵌合体。
2022年04期 v.30;No.158 1208-1212页 [查看摘要][在线阅读][下载 1332K] [下载次数:140 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] - 钟艳平;陈浩;周丹;邹红岩;
目的:对3例PCR-SBT结果零错配的HLA-C罕见等位基因进行全长测序分析,以确定其真实基因型。方法:从临床移植配型样本中筛查出3例PCR-SBT结果零错配的HLA-C罕见等位基因,应用下一代测序技术检测序列全长以准确分型。结果:3例样本PCR-SBT分型结果分别为HLA-C*03:04,HLA-C*12:167;HLA-C*07:291,HLA-C*15:02;HLA-C*01:43,HLA-C*08:16;除HLA-C*03:04、HLA-C*15:02为HLA常见等位基因,其他等位基因均不在中国常见及确认HLA等位基因CWD表(2.3版本)中。NGS全长测序发现3例样本HLA-C基因型均为常见等位基因和新等位基因的组合,3个新等位基因分别在第6、2、4外显子存在一个碱基突变。新鉴定的等位基因序列已提交给Genbank数据库(MK629722、MK335474、MK641803),被WHO HLA命名委员会正式命名为HLA-C*03:04:74、HLA-C*15:192、HLA-C*08:01:25。3例样本的HLA高分辨分型结果应该为HLA-C*03:04:74,12:03;HLA-C*07:02,15:192;HLA-C*01:02,08:01:25。结论:HLA分型结果中含有罕见等位基因的零错配结果应谨慎对待,须通过NGS或克隆等方法对全长序列加以复核确认。本实验室通过加做NGS最终确认3例PCR-SBT零错配的HLA-C基因型均为常见等位基因和新等位基因的组合,为临床移植配型提供了准确依据,丰富了人类HLA遗传数据库。
2022年04期 v.30;No.158 1213-1218页 [查看摘要][在线阅读][下载 1376K] [下载次数:105 ] |[引用频次:1 ] |[阅读次数:0 ] - 周超;徐军;马继华;金小波;陈学军;
目的:探讨胎儿/新生儿同种免疫性血小板减少症(FNAIT)的发病机制及临床诊断,分析疾病相关的实验室检测结果和临床资料,为临床治疗和改善预后提供参考。方法:回顾性分析2017年3月至2020年9月本院新生儿科6例FNAIT患儿的临床资料,对其实验室诊断、临床症状、治疗方法及预后进行总结和分析。结果:2例患儿发生在初次妊娠,4例发生在再次妊娠;6例患儿在入院时或住院期间血小板计数均出现降低,母子血清同种免疫性血小板抗体检测均为阳性;5例患儿不同程度地出现皮肤、颜面部出血点或瘀点瘀斑、颅内出血等症状。4例患儿经丙种球蛋白和(或)类固醇激素治疗,其中1例输注交叉配合型血小板治疗,另2例自行好转。5例患儿痊愈出院,1例患儿未愈,家属自行要求出院。4例患儿住院天数在2周内,2例患儿因合并其他疾病或因素(如新生儿败血症、新生儿肠炎、先天性心脏病、新生儿窒息等)而超过2周。结论:FNAIT表现为血小板数降低,可伴或不伴出血症状,可发生在初次和再次妊娠,可自行好转或经治疗后预后良好,合并有其他疾病或因素可能影响预后。
2022年04期 v.30;No.158 1219-1223页 [查看摘要][在线阅读][下载 1038K] [下载次数:216 ] |[引用频次:3 ] |[阅读次数:0 ]
- 闫洪敏;郑晓丽;朱玲;丁丽;韩冬梅;刘静;薛梅;李晟;王恒湘;
目的:分析重型再生障碍性贫血(SAA)患者造血干细胞移植(HSCT)后淋巴组织增殖性疾病(PTLD)的临床特征,以提高对PTLD的诊疗水平。方法:回顾分析2010年9月至2017年9月在单中心行HSCT的192例SAA患者的临床资料,分析PTLD的有效预警和治疗方法。本组患者预处理方案中均含有ATG并接受间充质干细胞(MSC)输注。结果:192例SAA患者HSCT移植后有14例并发了EBV+PTLD,总体发生率为7.29%,其中临床诊断5例,病理诊断9例,移植后PTLD发生中位时间72(35-168)d,所有PTLD均发生了EBV感染,且EBV高载量大于1×104copies/ml(P<0.01)。年龄≤12岁和> 12岁患者分别有11.11%和2.38%发生PTLD(P<0.01)。单因素及多因素分析结果显示,EBV感染、≤12岁患者、非血缘HSCT中HLA配型不相合供者移植及发生II度以上aGVHD均为PTLD高危因素(P<0.05)。监测发现EBV> 104copies/ml时,减停免疫抑制剂(RIS)和利妥昔单抗(RTX)抢先治疗有效,疗效不佳者及时联合化疗及EBV-CTL治疗后所有患者PTLD得到控制,治疗有效率100%。随访中位时间为65(62-115)个月,除1例患者在PTLD控制后7个月时死于脑出血外,余下患者均长期生存,总体生存率为92.85%。结论:SAA患者接受预处理含有ATG和MSC的HSCT后PTLD发生与EBV高拷贝密切相关,年龄≤12岁儿童、非血缘HSCT中供者为HLA不全相合的移植及合并有II度以上aGVHD者移植后PTLD高发;RIS/RTX抢先治疗有效,疗效不佳患者及时应用CTL及联合化疗是控制病情有效及重要方法。
2022年04期 v.30;No.158 1224-1229页 [查看摘要][在线阅读][下载 1065K] [下载次数:205 ] |[引用频次:3 ] |[阅读次数:0 ] - 韩冬梅;丁丽;郑晓丽;闫洪敏;薛梅;刘静;朱玲;李晟;王恒湘;
目的:分析单倍体造血干细胞移植(haplo-HSCT)联合间充质干细胞治疗重型再生障碍性贫血(SAA)预后的影响因素。方法:回顾性分析2014年1月至2019年8月在空军特色医学中心接受haplo-HSCT联合间充质干细胞输注治疗的SAA患者共127例,中位年龄11(1-37)岁,中位随访时间为39.8(1-74)个月。结果:粒系和血小板的平均植入时间分别为14和18 d。+100 d III-IV度急性移植物抗宿主病(aGVHD)的累积发生率为4.4%±1.9%,2年广泛性慢性移植物抗宿主病(cGVHD)的累积发生率为8.3%±2.7%,3年总体生存(OS)为86.1%±3.1%。单因素分析结果显示:高剂量的CD34+细胞输注(>6.69×106/kg)可以促进粒系(97.9%±0.05%vs 88.6%±0.13%d+21, P=0.0006)和血小板(81.2%±0.33%vs 70.8%±0.26%d+28, P=0.002)的植入而不升高II-IV度a GVHD的发生率(10.4%±0.1%vs 18.9%±0.1%d+100, P=0.18)。高剂量有核细胞输注(>12.78×108/kg)可以提高患者的3年OS(91.3%±3.2%vs78.1%±6.5%, P=0.03)并减低II–IV度a GVHD的发生率(8.6%±0.13%vs 21.7%±0.25%d+100, P=0.04)。≤12岁的儿童患者粒系植入更快(94.9%±0.06%vs 87.5%±0.24%d+21, P=0.02),3年OS更高(93.6%±2.8%vs 75.9%±6.4%,P=0.006),3年无失败生存(FFS)更高(93.6%±2.8%vs 68.3%±7.1%,P=0.000),发病至移植时间间隔越短(≤29.5个月),患者的3年FFS越高(88.8%±3.5%vs 74.2%±7.2%, P=0.028)。供者为女性的男性患者,广泛性cGVHD的2年累积发生率较其他患者更高(23.3%±2.4%vs 5.4%±2.4%,P=0.01)。结论:在SAA的haplo-HSCT中,儿童患者的预后明显优于成人,输注较多的CD34+细胞及有核细胞可以促进植入、减低aGVHD发生、提高总体生存。SAA患者应尽早行HSCT,男性患者应尽量避免女性供者以减少cGVHD的发生。
2022年04期 v.30;No.158 1230-1237页 [查看摘要][在线阅读][下载 1371K] [下载次数:290 ] |[引用频次:2 ] |[阅读次数:0 ] - 卢佳配;温树鹏;王福旭;李淑慧;牛志云;王颖;周子玮;徐铮;王真真;张学军;
目的:分析恶性血液病患者异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后复发的生存情况、预后影响因素及复发的防治,探讨免疫重建、人类白细胞抗原丢失等与移植后复发的关系。方法:回顾性分析2012年7月至2020年6月行allo-HSCT后复发的47例恶性血液病患者临床资料,同胞HLA全合移植(MSD)20例,亲缘单倍体移植(HID)26例,非血缘HLA全合移植(MUD)1例,对可能影响复发后总生存率(PROS)的危险因素进行多因素分析。结果:47例患者均成功植入,移植后Ⅱ-Ⅳ和Ⅲ/Ⅳ度急性移植物抗宿主病(aGVHD)发生率分别为40.4%和10.6%,慢性移植物抗宿主病(cGVHD)的发生率为31.9%。HID组Ⅱ-Ⅳ度aGVHD、Ⅲ/Ⅳ度aGVHD发生率分别为42.3%、11.5%,全合(MD)组分别为38.1%、9.5%(P=0.579,P=1.000),两组cGVHD发生率分别为34.6%、28.6%(P=0.659)。移植后30 d NK细胞绝对值计数>190 cells/μl的患者比≤190 cells/μl的患者PROS高(P=0.021)。全部患者移植后1、3年PROS分别为68.1%、28.4%,HID组分别为78.9%、40.3%,MD组分别为54.4%、14%(P=0.048)。多因素分析结果显示,发生Ⅱ-Ⅳ度aGVHD、复发时间<3个月是影响PROS的危险因素(P<0.05)。结论:恶性血液病allo-HSCT后复发患者行单倍体移植疗效比全相合移植好,移植后30 d NK细胞绝对值计数高可提高PROS,移植后发生Ⅱ-Ⅳ度aGVHD、复发时间<3个月对移植后复发患者的长期生存具有预后意义。
2022年04期 v.30;No.158 1238-1243页 [查看摘要][在线阅读][下载 1067K] [下载次数:188 ] |[引用频次:2 ] |[阅读次数:0 ] - 郑晓丽;闫洪敏;肖黎;韩冬梅;丁丽;薛梅;朱玲;刘静;张妲;王恒湘;
目的:探讨异基因造血干细胞移植术后并发甲状腺功能亢进的临床特点、发病机制、治疗及预后情况。方法:回顾性分析中国人民解放军空军特色医学中心7例异基因造血干细胞移植术后并发甲状腺功能亢进患者的临床资料。结果:7例患者中,男5例,女2例,中位年龄为25(7-32)岁,儿童1例,其余6例为成人,急性白血病3例,慢性粒细胞白血病1例,骨髓增生异常综合征1例,重型再生障碍性贫血2例。6例患者接受单倍体相合造血干细胞移植,1例接受无关供者全相合造血干细胞移植。所有患者均未应用含全身照射(TBI)的预处理方案,发生甲状腺功能亢进中位时间为20(9-25)个月。2例患者在诊断甲亢时合并慢性移植物抗宿主病,经激素及抗排异治疗后,甲亢得到控制,但其中1例在3个月后出现甲状腺功能减退症状,需要长期口服左甲状腺素维持。1例应用131I治疗后出现甲状腺功能减退症状,其余4例患者均应用甲巯咪唑治疗,3例甲状腺功能正常,1例在口服甲巯咪唑后1年出现甲状腺功能减退症状,口服左甲状腺素片维持治疗。结论:异基因造血干细胞移植术后甲状腺功能亢进是少见并发症,但严重影响患者生活质量,移植后长期存活患者需定期监测甲状腺功能,治疗上需根据引起甲状腺功能亢进的原因进行。
2022年04期 v.30;No.158 1244-1247页 [查看摘要][在线阅读][下载 1012K] [下载次数:182 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] - 张倩;鹿迎雪;薛超;渠清源;姜玉杰;
目的:分别使用全身照射(TBI)与白消安联合环磷酰胺(BU/CY)两种预处理方案建立异基因造血干细胞移植后的急性移植物抗宿主病(a GVHD)小鼠模型,并探讨两种预处理方案建立a GVHD小鼠模型的效果。方法:以C57BL/6雄性小鼠(H-2Kb)为供鼠,分离股骨、胫骨骨髓细胞及脾单个核细胞,使用TBI预处理BALB/c雌性小鼠(H-2Kd),同时使用BU/CY方案预处理CB6F1雌性小鼠(H-2Kd/b)后,两组小鼠经尾静脉分别注射供鼠骨髓细胞1×10~7/50μl和2×10~7/100μl,脾单个核细胞2×107/100μl和1×10~8/500μl。通过移植后表现、嵌合率、靶器官损害等验证、对比两组a GVHD建模效果。结果:两组小鼠移植后均出现精神萎靡、活动度下降、体重连续下降,以及不同程度的脱毛、弓背体位、腹泻及肛门肿胀等aGVHD表现,所有小鼠在4周内全部死亡;流式细胞术检测结果显示,两组小鼠移植后均完全嵌合;病理检查显示,小鼠皮肤、肠道、肝脏、肺和脾等靶器官组织可见明显的aGVHD病理学改变。TBI组小鼠较BU/CY组小鼠表现出更为明显的体重下降、大面积脱毛及皮肤皱褶等典型体征,aGVHD评分显著高,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:TBI与BU/CY两种预处理方案可成功构建稳定的完全异基因造血干细胞移植与半相合骨髓移植后aGVHD模型,采用BU/CY预处理方案可更真实地模拟目前临床上更为常用的化疗为主的预处理方案的患者体内的生理状态,而TBI预处理方案的小鼠具有更为典型的aGVHD表现,操作更为简便,两种方案均可为后续研究aGVHD发生相关机制提供可靠的临床前模型。
2022年04期 v.30;No.158 1248-1254页 [查看摘要][在线阅读][下载 1454K] [下载次数:230 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ]