- 刘诗琦;程晶莹;姜雅静;李英;李庆华;庞天翔;
目的:通过生物信息学方法筛选急性髓系白血病(AML)患者骨髓间充质干细胞(BM-MSC)衰老相关的差异表达基因并予以验证,为AML的科研和临床提供新的分子标志物。方法:应用血液病医院AML患者BMMSC制作基因表达谱芯片并参考从NCBI数据库GEO中选取的芯片GSE84881,综合地进行数据分析并筛选差异表达基因。运用DAVID分析软件进行基因本体论(GO)富集分析和KEGG通路富集分析,筛选出与AML患者BM-MSC衰老相关的差异表达基因。收集病人及健康供者的骨髓样本,体外扩增MSC并应用RT-PCR技术检测衰老相关基因表达水平与芯片的一致性,辅以衰老相关β-半乳糖苷酶染色实验和MTT细胞增殖实验对AML患者BM-MSC表型和功能进行验证。结果:筛选出247个差异表达基因,其中有132个基因表达上调,115个基因表达下调。侧重分析6个衰老相关基因,包括表达上调基因COL3A1(P=0.025)、CRYAB(P=0.0003)、DCN(P=0.0368)以及表达下调基因CCL2(P=0.0256)、CTSC(P=0.0001)、IL6(P=0.0482)。RT-PCR实验结果提示,上述基因的表达差异与AML患者BM-MSC的衰老具有相关性。衰老相关β-半乳糖苷酶染色实验证实,AML患者BM-MSC的染色阳性率与健康供者相比显著增高(P<0.0001);MTT实验表明,与健康供者相比,AML患者BM-MSC的增殖能力降低(P<0.0001)。结论:运用生物信息学方法对AML患者BM-MSC的芯片数据进行探索研究,筛选并验证了6个与衰老相关的差异表达基因,分别是COL3A1,CRYAB,DCN,CCL2,CTSC和IL6,这为AML的科学研究和临床治疗提供了新线索。
2019年02期 v.27;No.138 311-317页 [查看摘要][在线阅读][下载 5219K] [下载次数:390 ] |[引用频次:2 ] |[阅读次数:171 ] - 赵梅;宫跃敏;杨晚竹;程辉;程涛;
目的:探讨骨髓血管微环境在MLL-AF9急性髓系白血病发病过程中的作用。方法:应用移植实验构建未照射MLL-AF9急性髓系白血病模型;利用half-bone免疫染色方法和双光子共聚焦多层多通道多视野成像技术,获取骨髓血管、骨内膜和巨核细胞的图像数据;应用流式细胞术分析不同解剖部位白血病细胞的特性。结果:在MLL-AF9急性髓系白血病发病早期阶段,白血病细胞在股骨干骺端的比例显著高于骨干处;进一步检测凋亡、增殖特性发现,股骨干骺端处的白血病细胞凋亡比例明显低于骨干区,且细胞增殖(S/G2/M期)也明显比骨干区活跃,提示不同解剖部位处白血病细胞的这些特性可能与不同的骨髓微环境有关。3种主要骨髓微环境成分(血管内皮细胞、骨内膜、巨核细胞)的图像数据显示:股骨干骺端和骨干处的血管分布不同;进一步比较白血病细胞与血管内皮细胞、骨内膜、巨核细胞的空间距离结果表明,白血病细胞与血管的空间距离更近,提示血管在白血病发病早期阶段中有重要作用。葡萄糖摄取实验和细胞内ROS检测表明,血管的作用与营养代谢途径无相关性。结论:血管微环境在白血病的发病中起了重要作用,但这种作用不是通过运输营养物质和清除代谢废物途径,可能与血管周的细胞因子或血管的其它作用有关。
2019年02期 v.27;No.138 318-326页 [查看摘要][在线阅读][下载 3416K] [下载次数:336 ] |[引用频次:3 ] |[阅读次数:178 ] - 成娟;马海珍;张豪;
目的:探讨不同类型的急性白血病患者外周血T淋巴细胞亚群、B淋巴细胞和NK细胞等在疾病的不同时期的变化及其临床意义。方法:采用流式细胞术检测95例初诊白血病患者[急性淋巴细胞白血病(ALL)43例,急性髓系白血病(AML)52例]诱导治疗前后及50例正常对照者外周血T淋巴细胞亚群、B淋巴细胞、NK细胞及Treg细胞百分比。结果:初诊白血病各组CD3~+、CD3~+CD4~+、CD3~+CD8~+、NK细胞阳性率和CD4~+/CD8~+比值均明显低于正常对照组(P<0.05),治疗后完全缓解患者的上述指标均明显高于治疗前(P<0.05)。初诊白血病各组患者Treg细胞阳性率均高于正常对照组(P<0.01),AML和ALL治疗组完全缓解患者Treg细胞阳性率较治疗前有所降低(P<0.05)。AML初诊组CD3-CD19~+细胞阳性率明显低于正常对照组(P<0.01),ALL初诊组CD3-CD19~+细胞阳性率高于正常对照组(P<0.01);治疗后AML组缓解患者CD3-CD19~+细胞阳性率高于治疗前(P<0.05),ALL组缓解患者CD3-CD19~+细胞阳性率明显低于治疗前(P<0.01);ALL治疗后未缓解者CD3-CD19~+细胞阳性率明显低于治疗前(P<0.01);ALL治疗后未缓解者的其余各项指标及AML治疗后未缓解者各项指标与治疗前比较无统计学差异。结论:初诊白血病各组T淋巴细胞亚群、B淋巴细胞和NK细胞的变化明显,完全缓解组的上述指标基本恢复正常,说明T淋巴细胞亚群、B淋巴细胞、NK细胞水平检测在评价急性白血病严重程度、疗效及判断患者预后有一定的临床价值。
2019年02期 v.27;No.138 327-330页 [查看摘要][在线阅读][下载 1088K] [下载次数:442 ] |[引用频次:15 ] |[阅读次数:133 ] - 陈熙勐;张皓旻;杨波;卢学春;贺培凤;
目的:利用GEO数据库和TCGA数据库的数据,通过多组学分析方法分析与急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)发生、发展及不良预后相关的分子标志物。方法:从GEO数据库下载符合要求的转录组数据,运用R语言Limma程序包进行差异表达基因的筛选,并对差异表达基因进行GO功能富集分析和KEGG通路富集分析,同时使用STRING数据库数据,利用Cytoscape软件构建蛋白质相互作用网络,筛选出hub gene,结合TCGA数据库附带的临床信息对hub gene进行预后分析。结果:共筛选出620个差异基因,上调的差异表达基因162个,下调的差异表达基因458个。综合GO功能富集、KEGG通路富集分析及蛋白相互作用网络结果,筛选出CXCL4、CXCR4、CXCR1、CXCR2、CCL5、JUN为hub gene。生存分析显示,CXCL4、CXCR1、CCL5高表达是患者预后不良的危险因素。结论:CXCL4、CXCR1、CCL5可以作为AML发生、发展的相关生物标志物,且与不良预后相关,这可以为进一步研究提供依据。
2019年02期 v.27;No.138 331-338页 [查看摘要][在线阅读][下载 3491K] [下载次数:536 ] |[引用频次:19 ] |[阅读次数:247 ] - 包斌霞;安曦洲;李朋飞;李永婧;崔颖慧;唐雪;刘奇慧;胡艳妮;刘威;梁绍燕;于洁;
目的:研究E-cadherin基因在儿童急性白血病(AL)中的表达及其与临床指标的相关性,并探讨其可能的调控机制。方法:采用实时荧光定量PCR检测135例初诊AL患儿骨髓单个核细胞中E-cadherin mRNA的表达水平,并分析其表达水平与临床指标的相关性;应用Western blot法检测E-cadherin、β-catenin、Akt、p-Akt信号通路相关蛋白的表达;同时收集22例非恶性血液病患儿的骨髓作为对照。结果:B-ALL、T-ALL、AML组中E-cadherin mRNA的表达均低于对照组(P<0.01)。在B-ALL中,中危组患儿E-cadherin基因表达水平较标危组显著下降(P<0.05);伴有脾脏浸润的患儿E-cadherin基因表达水平亦显著降低(P<0.01);而在T-ALL、AML患儿各临床指标分组中,E-cadherin基因表达水平均无显著差异。在B-ALL患儿中,免疫分型为Common-BALL的患儿E-cadherin基因表达水平较其他B-ALL患儿显著升高(P<0.01)。而在3种AL的FAB分组间均未见E-cadherin表达差异。基于计量资料的相关性分析表明,B-ALL患儿中,随着E-cadherin表达水平的下调,初诊外周血白细胞(WBC)计数、乳酸脱氢酶(LDH)水平有升高趋势(r=-0.419,r=-0.269),而初诊外周血血小板水平呈下降趋势(r=0.335);在T-ALL患儿中,E-cadherin表达水平与LDH、初诊骨髓幼稚细胞比例呈显著负相关(r=-0.567,r=-0.557);而在AML患儿中,随着E-cadherin表达水平下调,初诊WBC计数水平和初诊骨髓幼稚细胞比例呈上升趋势(r=-0.368,r=-0.391)。与对照组比较,3种AL患儿中E-cadherin表达水平下调(P<0.001),而β-catenin、Akt则上调(P<0.01),p-Akt、p-Akt/Akt表达量在T-ALL中上调(P<0.01)。结论:E-cadherin基因表达降低或缺失是儿童急性白血病的预后不良相关因素,可能通过激活Wnt/β-catenin和PI3K/Akt信号通路,促进肿瘤的发生,并引起细胞的一系列恶性生物学行为,E-cadherin有望成为判断预后和指导个性化治疗的指标。
2019年02期 v.27;No.138 339-347页 [查看摘要][在线阅读][下载 1598K] [下载次数:119 ] |[引用频次:2 ] |[阅读次数:255 ] - 刘松柏;储小玲;撖荣;杜佳慧;邱桥成;薛胜利;
目的:检测分析急性髓系白血病(acute myeloid leukemia, AML)患者FANCJ基因突变情况,为研究FANCJ突变类型的AML疾病致病机理奠定基础,同时为其疾病防治提供指导。方法:在FANCJ基因蛋白编码区设计引物,采用PCR扩增及sanger测序法检测222例初诊AML患者骨髓细胞中FANCJ基因编码区突变情况,同时检测AML患者黏膜上皮组织FANCJ基因突变情况;采用NCBI Blast在线生物信息学软件分析FANCJ基因突变在不同物种中的进化保守性。结果:测序分析显示,FANCJ基因在蛋白编码区的11个位点出现突变,分别为exon5:c.G430A:p.A144T,exon6:c.A587G:p.N196S,exon9:c.C1255T:p.R419W,exon10:c.G1442A:p.G481D,exon11:c.C1609G:p.L537V,exon16:c.C2360T:p.P787L,exon17:c.C2440T:p.R814C,exon19:c.C2608T:p.H870Y,exon19:c.A2686G:p.I896V,exon19:c.C2830G:p.Q944E,exon20:c.G3412A:p.D1138N,其中A144T、N196S、R814C、I896V及Q944E突变存在复现性;另外,A144、R419、G381、L537、P787、H870、Q944及D1138位点在不同物种中高度保守。结论:在222例AML患者中发现26名患者中存在FANCJ突变,并且突变位点在不同物种中相对保守,功能重要,这为接下来研究FANCJ突变类型的AML疾病致病机理奠定基础,同时为疾病防治提供指导。
2019年02期 v.27;No.138 348-353页 [查看摘要][在线阅读][下载 1411K] [下载次数:96 ] |[引用频次:3 ] |[阅读次数:202 ]
- 贾艳楠;李艳;弓晓媛;刘凯奇;叶蕾;王慧君;李庆华;李承文;王迎;王建祥;秘营昌;
后。方法:依据欧洲白血病免疫分型协作组(EGIL)的积分系统和WHO2008诊断标准回顾性判断并总结2002年6月至2016年6月收治的33例Ph~+M PAL患者资料,分析骨髓细胞形态学、免疫表型、细胞遗传学和分子生物学等特点。采用急性淋巴细胞白血病(ALL)化疗方案或兼顾髓系、淋系的联合化疗方案,部分患者治疗期间加用酪氨酸激酶抑制剂(TKI),5例在缓解期进行异基因造血干细胞移植。结果:Ph~+M PAL男性多见(男女比例为1. 75∶1),诊断时白细胞计数较高,WBC≥30×10~9/L者25例(75. 8%),WBC≥100×10~9/L者13例(39. 4%)。33例Ph~+M PAL患者中,髓系和B系抗原共表达者(M/B) 32例(97. 0%),髓系、B淋系、T淋系抗原共表达者(M/B/T) 1例(3. 0%)。无髓系、T系混合及B系、T系混合者。本组病例中符合EGILl998诊断标准的共19例(57.6%),其余14例患者经复核符合WHO 2008诊断标准。在进行有效染色体分析的31例患者中,单纯t(9; 22) 13例(41. 9%),t(9; 22)伴附加染色体异常的患者10例(32. 3%),无t(9; 22)染色体异常8例(25. 8%)。31例患者行BCR/ABL融合基因(P190、P210)检测,表明其中单纯P190~+者17例(54. 8%),单纯P210~+者8例(25. 8%),P190、P210双表达者4例(12. 9%),P190、P210均未检出者2例(6. 5%)。第1次诱导治疗期间联合与未联合TKI者完全缓解率(CR)分别为81. 3%与46. 7%(P=0. 042)。诱导治疗后复查融合基因(PCR)转阴2/17例,巩固治疗期间复查融合基因(PCR)转阴9/16例(其中包括3例干细胞移植后转阴患者),中位转阴时间2. 87(1. 13-9.20)个月。结论:Ph~+M PAL以男性居多,起病时高白细胞数,以B系和髓系抗原共表达最常见,预后差,化疗联合伊马替尼及异基因造血干细胞移植可能有助于提高疗效。
2019年02期 v.27;No.138 354-359页 [查看摘要][在线阅读][下载 132K] [下载次数:203 ] |[引用频次:4 ] |[阅读次数:203 ] - 张建华;张傲利;董春霞;秦小琪;张睿娟;葛晓燕;康建民;侯彦飞;张耀方;郭建利;杨林花;
目的:观察青年中、低危急性髓系白血病(AML)在第1次完全缓解期(CR1)接受白消安(BU)/环磷酰胺(CY)改良方案预处理后行自体外周血造血干细胞移植(auto-PBHSCT)的安全性及疗效。方法:采用回顾性分析方法探讨改良BU/CY预处理联合auto-PBSCT的疗效。本院2013年5月至2016年12月期间10例青年中、低危AML患者,无异基因干细胞移植条件、CR1期接受以改良的BU/CY方案预处理联合auto-PBSCT,移植后3个月开始白介素-2(IL-2)或IL-2+二盐酸组胺维持治疗18个月。观察预处理方案的毒副作用、造血恢复时间、移植后100 d及1年内死亡率、复发率、2年及3年无白血病生存率(LFS)、3年及4年总生存率(OS)。结果:常见的非血液学毒性反应为胃肠道反应(轻度7例、中度3例、重度1例)、轻度肝损害(4例)、出血性膀胱炎0例、轻中度感染10例(血流感染5例,肠道感染2例,肛周感染3例,口腔感染2例)。患者均达到清髓效果,中性粒细胞(ANC)<0.5×10~9/L中位时间为1.5(0-3 d)d,血小板(Plt)<20×10~9/L中位时间为3(2-5)d。移植后中性粒细胞植入中位时间为13(10-19)d,血小板植入中位时间为32(10-72)d。移植后100 d及1年内死亡率为0。1例移植后半年复发,1例移植后14个月复发。移植后中位随访时间48.1个月,至随访日中位生存时间54.7个月。2年LFS为100%(10例),3年LFS为80%(8例);3年OS为80%(8例),4年OS为70%(7例)。结论:改良的BU/CY+auto-PBSCT治疗模式可达到清髓目的,对青年中、低危AML疗效明确,移植相关死亡率低,LFS及OS时间较长,可作为无异基因造血干细胞移植条件患者的另一个治疗选择。
2019年02期 v.27;No.138 360-364页 [查看摘要][在线阅读][下载 1187K] [下载次数:285 ] |[引用频次:6 ] |[阅读次数:253 ] - 侯降雪;王树娟;刘延方;郝倩倩;王冲;李涛;白俊俊;廖林晓;郭程娱;常银银;王萌;孙慧;谢新生;姜中兴;
目的:探讨NPM1基因突变阳性成人急性髓系白血病(NPM1+AML)患者的临床特征、伴随基因突变特征及影响预后的因素。方法:收集并应用第二代测序法测定22种AML常见的基因突变中NPM1基因突变阳性初诊成人AML患者73例,用实时荧光定量PCR法测定43种AML常见的融合基因,应用Kaplan-Meier生存曲线和Cox多因素回归分析影响预后的因素。结果:73例NPM1+AML患者中,共检测到74个NPM1基因位点突变,其发生率分别为L287fs(92.0%)、Q289fs和W288fs(2.7%)、L258fs和Q289H(1.4%),其中1例患者存在2个NPM1突变位点;不同突变位点对NPM1+AML的预后无影响。NPM1变异等位基因频率(VAF)的中位值为35.4(1.8-56.6)%,以四分位数上间距38.4%为界,NPM1 VAF>38.4%的AML患者(NPM1highAML)与NPM1VAF≤38.4%的患者(NPM1lowAML)相比,早期死亡率显著增加(33.3%vs 7.3%,P<0.05)、中位EFS(148 d,95%CI 58-238 vs 372 d,95%CI 264-480 d)(P<0.01)及中位OS(179 d,95%CI 6-352 d vs 444 d,P<0.01)均显著缩短。在87.7%的NPM1+AML患者中共检测到126个伴随基因突变;NPM1伴随NRAS基因突变的患者完全缓解率高(100%vs 58%)(P<0.05),且中位OS时间显著延长(未达到vs 320 d,95%CI 150-490 d)(P<0.05)。73例NPM1+AML患者中65例完善了43种融合基因检查,所有患者融合基因检查结果均为阴性。多因素分析显示,NPM1 VAF>38.4%是EFS(HR=3.1,95%CI 1.6-6.4,P<0.01)及OS(HR=3.0,95%CI 1.4-6.2,P<0.01)的独立预后不良因素。结论:AML患者NPM1基因突变常伴随其它基因突变,但罕有融合基因并存;NPM1高突变负荷是NPM1阳性成人AML患者的独立预后不良因素。
2019年02期 v.27;No.138 365-372页 [查看摘要][在线阅读][下载 1332K] [下载次数:186 ] |[引用频次:16 ] |[阅读次数:383 ] - 黄春燕;查显丰;温旺荣;
目的:探讨PD-L1和MicroRNA-138-5p(miR-138)在急性髓系白血病(AML)患者外周血单个核细胞(PBMNCs)中的表达特点及其临床意义。方法:应用SYBR GreenⅠreal-time PCR方法分别检测20例初治AML患者、9例复发/难治AML患者和8例完全缓解患者PBMNCs中PD-L1 mRNA和miR-138的表达水平,并选择20例健康体检者外周血样本作为对照组。结果:初治AML组和复发/难治AML组患者PD-L1的表达水平均显著高于健康对照组(P<0.01),而且复发/难治AML组患者PD-L1的表达水平显著高于初治AML组患者(P<0.01);初治AML组和复发/难治AML组患者miR-138的表达水平均显著低于健康对照组(P<0.01);在20例初治AML患者中共收集了8例完全缓解期标本,完全缓解组mi R-138的表达水平高于初治AML组(P<0.05),而缓解组PD-L1的表达水平与初治AML组差异无统计学意义(P>0.05);初治AML患者中PD-L1 mRNA与mi R-138表达呈负相关(P<0.05)。结论:AML患者PBMC中PD-L1表达增加、miR-138表达下调,且两者间有相关性。
2019年02期 v.27;No.138 373-378页 [查看摘要][在线阅读][下载 1410K] [下载次数:156 ] |[引用频次:5 ] |[阅读次数:200 ] - 汤慧敏;丁薇;丁亦含;吴晶晶;李玉峰;
目的:探讨泛素蛋白酶系统(UPS)对伊马替尼(IM)耐药细胞株K562/G01中BCL6蛋白水平及耐药细胞增殖和凋亡的影响。方法:应用Western blot技术检测蛋白酶抑制剂MG-132处理CML细胞前后BCL6蛋白水平差异;用RT-PCR及Western blot方法分别检测ML364(泛素特异性蛋白酶USP2抑制剂)处理前后K562/G01细胞株中BCL6及USP2 mRNA和蛋白的表达水平;应用CCK-8法及流式细胞术分别检测ML364和IM单用及联用对K562/G01细胞增殖及凋亡的影响。结果:蛋白酶抑制剂M G132处理后,K562/G01的BCL6蛋白水平显著上升(P<0. 05); K562/G01细胞株的去泛素化酶USP2 mRNA和蛋白表达水平均高于K562细胞株(P <0. 05); M L364处理K562/G01后,USP2和BCL6蛋白表达水平同步下调(P <0. 05);与IM单药组相比,ML364与IM联合用药组K562/G01细胞增殖抑制率及细胞凋亡率均明显升高(P <0. 05)。结论:M L364通过抑制USP2介导的BCL6蛋白去泛素化水平降低K562/G01细胞株BCL6蛋白稳定性,使K562/G01细胞株中BCL6蛋白表达下调,从而增加耐药细胞对IM的敏感性。
2019年02期 v.27;No.138 379-384页 [查看摘要][在线阅读][下载 816K] [下载次数:337 ] |[引用频次:5 ] |[阅读次数:199 ] - 肖亮;彭志刚;罗斌;姚奕斌;
目的:探讨芒果苷对FLT3-TD突变阳性急性髓系白血病细胞增殖、凋亡周期的影响及其机制。方法:应用CCK8法检测不同浓度芒果苷作用不同时间对MV4-11细胞增殖的影响;应用流式细胞术检测细胞凋亡、细胞周期及FLT3跨膜蛋白的表达;应用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测FLT3 mRNA的表达。结果:芒果苷对白血病细胞MV4-11具有明显抑制作用,且呈浓度效应关系(48 h,r=0.922;72 h,r=0.959;96 h,r=0.973);不同浓度芒果苷作用MV4-11细胞48 h时,观察到细胞周期内G0/G1期比率升高, S期比率下降,且随芒果苷浓度增高细胞凋亡越明显,IC50浓度芒果苷作用MV4-11细胞48 h后FLT3跨膜蛋白表达明显下降;qRT-PCR结果显示,芒果苷作用MV4-11细胞后FLT3mRNA表达明显降低(P<0.05)。结论:芒果苷可抑制MV4-11细胞增殖,阻滞细胞周期进程和促进细胞凋亡,其机制可能与芒果苷抑制FLT3活性继而影响下游与凋亡、增殖有关的信号传导通路有关。
2019年02期 v.27;No.138 385-389页 [查看摘要][在线阅读][下载 1332K] [下载次数:237 ] |[引用频次:4 ] |[阅读次数:195 ] - 陈冬;陆滢;裴仁治;叶佩佩;张丕胜;马俊霞;
目的:探讨地西他滨联合低剂量CAG化疗方案治疗老年复发/难治性急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者的疗效、预后及安全性。方法:回顾性分析本院在2014年1月至2016年8月收治的40例老年复发/难治性AML患者(69-85岁)的临床资料,根据治疗方案不同分为联合治疗组和对照组,各20例。联合治疗组采用地西他滨联合低剂量CAG方案(地西他滨,15 mg/m~2,d 1;阿克拉霉素,10 mg/m~2,d 3-6;注射用阿糖胞苷,10 mg/m~2,d 1-14;注射用重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(G-CSF),200μg/(m~2·d),d 1-14)。对照组采用标准CAG方案(阿克拉霉素20 mg/m~2,d 1-4;注射用阿糖胞苷,15 mg/m~2,d 1-14;G-CSF400μg/(m~2·d),d 1-14)。2周1疗程,连续用药2个疗程。比较2组患者的完全缓解率(CR)、总缓解率(ORR),总生存时间(overall survival,OS)、1年生存率,血红蛋白、白细胞、血小板的改善,不良反应发生率。结果:联合治疗组CR 55.00%(11/20),OR 85.00%(17/20)(P <0.05);CAG组CR 30.00%(6/20),OR50.00%(10/20)。截止至2018年2月,40例患者中17例存活,20例死亡,3例失访,中位随访时间12(2-35)个月。联合治疗组中位生存时间13(2-35)个月,1年OS率为70.00%;CAG组中位生存时间10(2-31)个月,1年OS率为50.00%,差异无统计学意义(P> 0.05)。治疗后联合治疗组外周血WBC、Plt数高于CAG组,Hb水平低于CAG组,差异具有统计学意义(P<0.05)。联合治疗组肺部感染、恶心呕吐发生率高于CAG组(65.00%vs 25.00%,50.00%vs 20.00%),差异具有统计学意义(P <0.05)。结论:地西他滨联合低剂量CAG方案治疗老年复发/难治性AML近期疗效显著,远期疗效并无差异,但不良反应增加,在临床在治疗过程中要及时给予预防性处理。
2019年02期 v.27;No.138 390-395页 [查看摘要][在线阅读][下载 1178K] [下载次数:251 ] |[引用频次:28 ] |[阅读次数:215 ] - 徐敏;高雯琬;雒钰杰;王毅;陶崑;
目的:探讨miR-30a的高表达对慢性髓系白血病K562细胞株的促凋亡作用及其机制。方法:构建pEGFP-pre-miR-30a重组质粒并转染K562细胞,采用实时定量PCR法检测miR-30a和BCR/ABL mRNA的表达水平,应用annexinV-FITC/PI双集流式细胞术(flow cytometry,FCM)分析K562细胞凋亡百分率,应用蛋白印迹法(Western blot)分析BCR/ABL融合蛋白、凋亡相关蛋白BCL-2、BAX及PTEN、AKT、p-AKT的变化。结果:测序与酶切图谱证实成功构建重组质粒。与pEGFP-C1-K562阴性对照组和K562空白对照组比,重组质粒pEGFP-pre-miR-30a转染组miR-30a表达水平显著升高,BCR/ABL mRNA与蛋白表达明显下调,凋亡细胞所占比例明显增加(P<0.05),抗凋亡蛋白BCL-2水平降低,促凋亡蛋白BAX表达增加,抑癌蛋白PTEN表达明显上升,AKT无明显变化,但活性形式的p-AKT显著降低,差异均有统计学意义。结论:高表达的miR-30a能抑制K562细胞癌基因BCR/ABL mRNA及蛋白的表达并促进细胞凋亡,其机制可能与抑制BCR/ABL-PTEN/AKT信号通路的活性有关。
2019年02期 v.27;No.138 396-402页 [查看摘要][在线阅读][下载 2019K] [下载次数:138 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:170 ] - 申振铭;庄步玺;赵瑶;王明松;徐鑫;胡振波;
目的:研究复方中药制剂对白血病细胞的作用及其机制。方法:用复方中药制剂处理体外培养的髓系白血病细胞株,用CCK8的方法观察中药制剂对白血病细胞增殖的影响,瑞氏染色法观察细胞形态学的变化,流式细胞术检测细胞凋亡并测定细胞表面分化抗原CD11b的表达水平。结果:与单纯的4种白血病细胞系HL-60,MOLM-13,MV4-11,AML-M5相比较,不同中药浓度处理的这4种白血病细胞增殖能力减弱(P<0.05)且其增殖抑制作用呈剂量依赖性(r=0.9236;r=0.7488;r=0.8889;r=0.8119);与单纯的HL-60和AML-M5白血病细胞系相比,药物处理的这2种白血病细胞有明显的分化形态改变;与单纯的HL-60白血病细胞系相比,IC50中药浓度处理的HL-60细胞表面抗原CD11B增加85%±7.13%;与单纯的AML-M5白血病细胞系相比,1.5μl和2μl剂量中药制剂处理的AML-M5细胞的凋亡率增加(P <0.05)。结论:复方中药制剂对白血病细胞具有抑制增值作用,其机制可能与诱导白血病细胞分化和凋亡作用相关。
2019年02期 v.27;No.138 403-408页 [查看摘要][在线阅读][下载 4503K] [下载次数:338 ] |[引用频次:7 ] |[阅读次数:238 ] - 汤红霞;王梦影;肖伟;温建伟;
目的:探讨靶向沉默信息调控因子2同源蛋白2(SIRT2)表达对急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)耐药细胞株HL-60/A凋亡的影响及其潜在机制。方法:采用Western blot分别检测HL-60/A及对药物相对敏感的亲代细胞株HL-60中SIRT2及自噬相关蛋白LC3、P62的表达。采用si RNA转染HL-60/A细胞,靶向抑制SIRT2表达后,采用Annexin V/PI双染法检测阿糖胞苷对HL-60/A细胞细胞凋亡的影响;采用Western blot和透射电子显微镜检测HL-60/A细胞的自噬影响。为明确自噬在SIRT2对HL-60/A耐药调节中的确切作用,在SIRT2沉默后加入自噬特异性激动剂雷帕霉素,再分别检测对HL-60/A细胞自噬与凋亡的影响。结果:HL-60/A细胞中SIRT2、LC3 Ⅱ/Ⅰ蛋白表达量较HL-60细胞明显增高(P<0.05),但P62表达显著降低(P<0.05)。siRNA成功转染HL-60/A细胞后,SIRT2表达量显著降低(P<0.05);LC3 Ⅱ/Ⅰ蛋白表达明显下降(P<0.05),同时P62蛋白表达上升;自噬体数目显著降低(P<0.05)。这提示,自噬受到抑制。SIRT2被沉默后, HL-60/A对阿糖胞苷的药敏性增加,细胞凋亡率显著上升(P<0.05)。而当加入雷帕霉素后,siRNA转染组中受到抑制的细胞自噬被激活,HL-60/A细胞重新表现出对阿糖胞苷的耐药性,细胞凋亡率较其他组明显下降(P<0.05)。结论:SIRT2的高表达激活了HL-60/A细胞保护性自噬机制,且与其耐药性密切相关。
2019年02期 v.27;No.138 409-414页 [查看摘要][在线阅读][下载 5837K] [下载次数:193 ] |[引用频次:2 ] |[阅读次数:189 ] - 何文华;
目的:研究ROCK1基因在急性淋巴细胞白血病(ALL)患者中的表达变化及其临床预后意义。方法:选择自2017年4月-2018年4月在本院接受治疗的60例ALL患者,同时选取60例健康体检者作为对照,从受试者静脉取血后分离单个核细胞,采用RT-PCR实验检测样本的ROCK1基因表达水平,采用Western blot实验检测ROCK1蛋白表达水平,统计学分析ROCK1基因表达与ALL患者临床特征的相关性。结果:ALL患者ROCK1基因相对表达水平为1.37(1.28-1.46),对照组ROCK1基因相对表达水平为1.06(0.96-1.12),ALL患者ROCK1基因水平显著高于对照组(P<0.05)。ALL患者ROCK1蛋白表达水平高于对照组(P<0.05)。ROCK1基因表达水平与ALL患者的年龄、白细胞计数、乳酸脱氢酶(LDH)水平及外周血幼稚细胞数有显著相关性(P<0.05)。ROCK1基因表达水平与ALL患者的性别、血红蛋白(Hb)水平、血小板数及免疫表型无相关性(P>0.05)。ROCK1低表达的B-ALL和T-ALL患者患者标危比例均显著高于ROCK1高表达的患者(P<0.05)。ROCK1低表达的B-ALL和T-ALL患者极高危比例均显著低于ROCK1高表达的患者(P<0.05)。ROCK1低表达组CR比例显著高于ROCK1高表达的患者(P<0.05)。ROCK1低表达组复发比例显著低于ROCK1高表达的患者(P<0.05)。Kaplan-Meier生存分析表明,ROCK1低表达ALL患者的OS和DFS均优于ROCK1高表达的患者(P<0.05)。多因素Cox回归分析结果表明,年龄及ROCK1基因是OS独立影响因素(P<0.05);白细胞计数及ROCK1基因是DFS独立影响因素(P<0.05)结论:ROCK1基因在ALL患者中表达水平较高,其高水平表达可能刺激ALL的发生,而下调ROCK1基因表达可能有助于提高ALL的治疗效果。
2019年02期 v.27;No.138 415-420页 [查看摘要][在线阅读][下载 1309K] [下载次数:90 ] |[引用频次:3 ] |[阅读次数:183 ]
- 蒋显勇;申浩睿;葛昌文;李剑;周道斌;
目的:确定骨髓涂片形态对弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)骨髓侵犯诊断的作用,并研究骨髓中DLBCL细胞的形态学特征。方法:分析北京协和医院于2006年~2016年间确诊的420例DLBCL。应用盲法分析骨髓涂片和骨髓穿刺活检的结果。结果:骨髓涂片(S)发现42例,骨髓活检(B)发现47例,两者共计(S+B)发现49例骨髓侵犯,2种诊断DLBCL骨髓浸润的方法之间有良好相关性(κ=0.889)。骨髓中DLBCL细胞的形态特征为中等大小、圆形或不规则的细胞核;染色质呈深紫红色和粗颗粒状,多数为1-5个核仁;胞浆量适中,呈深蓝色或灰蓝色,常见空泡和伪足。结论:骨髓细胞形态学检查在诊断DLBCL骨髓侵犯方面有一定的作用,不典型淋巴细胞占总有核细胞数1%以上时应高度重视并建议诊断为DLBCL的骨髓侵犯。
2019年02期 v.27;No.138 421-425页 [查看摘要][在线阅读][下载 5462K] [下载次数:176 ] |[引用频次:11 ] |[阅读次数:256 ] - 田甜;王莉;朱华渊;梁金花;吴微;曹蕾;范磊;李建勇;徐卫;
目的:总结原发扁桃体弥漫大B细胞淋巴瘤(PT-DLBCL)的临床特征、免疫表型及预后因素。方法:收集2009年10月至2018年2月初诊的37例PT-DLBCL患者临床资料,包括临床特征、分型、分期、疗效及预后,并进行回顾性分析。结果:37例中男性22例(59.5%),女性15例(40.5%),中位年龄57(16-86)岁。能明确细胞起源的36例患者中,生发中心B细胞(GCB)型占66.7%,非生发中心B细胞(non-GCB)型占33.3%。Ann Arbor分期Ⅰ期占40.5%,Ⅱ期占59.5%,无Ⅲ、Ⅳ期患者。中位随访时间44(10-101)月,2例患者(5.4%)失访。中位治疗6(3-8)个疗程后对35例患者进行评估。结果显示,26例(74.3%)达完全缓解(CR),8例(22.9%)达部分缓解(PR),1例(2.8%)患者疾病稳定(SD)。3年及5年无进展生存(PFS)均为82.5%,3年及5年总生存(OS)均为95.5%。5例(13.5%)患者接受了放疗。年龄>60岁(P<0.05)或年龄> 70岁(P<0.05)的患者PFS均较相对年轻患者短;LDH水平增高(P<0.001)、治疗方案中未使用R(P<0.05)的患者OS相对短。结论:PT-DLBCL患者对放、化疗敏感,预后较好,大多数患者治疗后可获得长期生存,联合免疫化疗的效果优于单纯化疗。
2019年02期 v.27;No.138 426-432页 [查看摘要][在线阅读][下载 1324K] [下载次数:160 ] |[引用频次:2 ] |[阅读次数:203 ] - 郑艳;朱雄鹏;李纯团;黄远玲;
目的:探索稳定下调钙网蛋白(calreticulin,CALR)对NK/T细胞淋巴瘤细胞SNK6细胞侵袭性的影响及其可能机制。方法:设计靶向人钙网蛋白的特异性短发卡RNA(short hairpin RNA,shRNA)序列,构建重组慢病毒载体;三质粒系统包装慢病毒颗粒,感染SNK6细胞,嘌呤霉素抗性筛选稳定下调钙网蛋白表白的SNK6细胞。应用CCK8法测定细胞增殖活力,Transwell小室测定细胞侵袭。Western blot检测SNK6细胞CALR表达水平,荧光定量PCR检测SNK6细胞CALR、MMP2、MMP9和VEGF的转录水平。结果:成功构建重组慢病毒载体pLKO.1-puro-shCALR,并包装慢病毒,筛选出稳定下调钙网蛋白的SNK6细胞株。稳定下调SNK6细胞钙网蛋白表达后,SNK6侵袭性减弱,MMP2、MMP9和VEGF的转录水平降低。结论:稳定下调SNK6细胞钙网蛋白的表达可使SNK6细胞侵袭性减弱,其机制可能与降低MMP2、MMP9和VEGF的转录水平有关。
2019年02期 v.27;No.138 433-438页 [查看摘要][在线阅读][下载 1897K] [下载次数:149 ] |[引用频次:4 ] |[阅读次数:230 ] - 姜艳;廖辉阳;杨秋实;程洋;胡雅宁;袁顺宗;苏航;
目的:探索抑癌基因Foxo1和PTEN在小鼠NK细胞淋巴瘤发生过程中是否发挥关键作用。方法:利用NKp46-iCre小鼠分别与Foxo1fl/fl、PTENfl/fl小鼠交配,得到NKp46-iCre;Foxo1fl/flPTENfl/fl(Foxo1△NKPTEN△NK)小鼠,即NK细胞内特异性敲除Foxo1和PTEN的小鼠,连续观察小鼠的生长发育和成瘤情况;利用流式细胞术检测NK细胞内Foxo1和PTEN双基因缺失后小鼠主要淋巴器官内的NK细胞的比例变化;利用B16F10恶性黑色素瘤移植瘤小鼠模型观察小鼠NK细胞内Foxo1和PTEN双基因缺失后对NK细胞的肿瘤免疫监视功能的影响。结果:成功建立了NK细胞特异性Foxo1和PTEN双基因缺失小鼠模型,连续观察小鼠46周,与对照组小鼠(Foxo1fl/fl PTENfl/fl)相比,小鼠生长未见明显异常,未形成自发性肿瘤。与对照组小鼠相比,Foxo1△NKPTEN△NK小鼠的外周血、淋巴结、骨髓、脾脏中NK细胞的比例无明显变化(PB:4.76%±0.46%vs 4.17%±0.64%)(P>0.05,n=8);(BM:1.13%±0.23%vs 1.31%±0.10%)(P>0.05,n=8);(LN:0.50%±0.10%vs 0.85%±0.20%)(P>0.05,n=8);(SP:4.41%±0.65%vs 3.5%±0.24%)(P>0.05,n=8)。B16F10恶性黑色素瘤移植瘤小鼠模型建立后,与对照组小鼠(Foxo1fl/fl PTENfl/fl)相比,Foxo1△NKPTEN△NK小鼠的生存时间比较无统计学差异(P>0.05,n=13)。结论:抑癌基因Foxo1、PTEN在小鼠NK细胞淋巴瘤发生过程中可能不具有关键作用,缺失后对体内NK细胞的肿瘤免疫监视功能影响不大。
2019年02期 v.27;No.138 439-444页 [查看摘要][在线阅读][下载 2240K] [下载次数:165 ] |[引用频次:2 ] |[阅读次数:163 ] - 韩波;高志棣;王海霞;王朝晖;范传波;刘俊玲;田猛;赵洪国;
目的:探讨miR-155在弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)组织中的表达,以及转染miR-155抑制物对DLBCL细胞生物学特性的影响。方法:选取2013年4月至2017年12月在本院接受治疗的DLBCL患者76例,同时选取因淋巴结反应性增生就诊的40例患者作为对照组。取2组患者组织标本。培养DB细胞并将其分为miR-155抑制物组、阴性对照组和空白组。使用实时荧光定量PCR技术检测DLBCL组和对照组组织及细胞中miR-155的表达;应用MTT法检测细胞的增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡情况;Transwell法检测细胞迁移和侵袭能力。结果:DLBCL患者组织中miR-155相对表达量(1.93±0.16)明显高于对照组(1.01±0.09)(t=33.991,P=0.000)。miR-155表达量在乳酸脱氢酶水平异常、BCL-2~+、MUM1~+和Ki-67≥50%、病理类型非GC型、Ann Arbor分期Ⅲ-Ⅳ期、结外病变数≥2和IPI评分3-5分的DLBCL患者组织中升高(P<0.05);miR-155抑制物组细胞中miR-155相对表达量明显低于阴性对照组和空白组(P<0.05),miR-155抑制物组细胞在培养24、48、72和96 h时吸光度A值明显低于阴性对照组和空白组(P<0.05),而细胞凋亡率则明显高于阴性对照组和空白组(P<0.05);miR-155抑制物组迁移细胞数和侵袭细胞数明显低于阴性对照组和空白组(P<0.05)。结论:miR-155在DLBCL患者组织中呈高表达,且与肿瘤恶性程度和侵袭进展有关,在特异性抑制DB细胞中miR-155的表达可减少细胞增殖,加速细胞凋亡,抑制细胞迁移及侵袭。
2019年02期 v.27;No.138 445-451页 [查看摘要][在线阅读][下载 2248K] [下载次数:106 ] |[引用频次:10 ] |[阅读次数:194 ] - 陈文婷;姚红霞;吴从明;刘丹;唐瑞梅;
目的:分析BCL-2、BCL-6和MYC检测在弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)患者中预后判断中的价值。方法:收集2012年3月至2015年3月本院收治的DLBCL患者163例患者的淋巴瘤组织标本,采用免疫组织化学方法检测患者BCL-2、BCL-6和MYC的表达水平,并用间期荧光原位杂交技术对IGH/BCL-2融合、BCL-6基因断裂及MYC基因断裂进行检测,进一步分析BCL-2、BCL-6和MYC表达水平与DLBCL患者临床病理特征及预后的相关性。结果:MYC、BCL-2及BCL-6均呈现棕黄色或棕褐色的阳性信号,其中MYC主要于细胞膜上呈现阳性表达,BCL-2主要于细胞质及局部细胞膜上呈现阳性表达,BCL-6主要于细胞核上呈现阳性表达。ECOG体能状态评分≥2分者BCL-2表达水平较<2分者明显升高,且免疫亚型为CD5~+、生发中心B细胞样(GCB)者BCL-2表达水平较非GCB者明显升高(P<0.05);国际预后指数(IPI)评分为3-5者MYC表达水平较0-2分者明显升高(P<0.05);免疫亚型为CD5~+、GCB者BCL-6表达水平较非GCB者明显降低(P<0.05)。经Cox多变量分析结果发现,BCL-2、BCL-6和MYC的表达水平与DLBCL患者总生存期和无进展生存期均存在显著关系(P<0.05)。结论:BCL-2、BCL-6和MYC作为重要的分子标志物,在评估DLBCL患者预后中具有较高的判断价值。
2019年02期 v.27;No.138 452-457页 [查看摘要][在线阅读][下载 2703K] [下载次数:309 ] |[引用频次:19 ] |[阅读次数:164 ]
- 常小刚;季鸥;姚浩;庄韵;董雯;林琳;沈群;
目的:观察冬凌草甲素(oridonin,ORI)对人骨髓瘤H929细胞株增殖、凋亡的影响,探讨其可能的作用机制。方法:分别用ORI 0、4、8、12、16、20、24、28、32μmol/L处理H929细胞12、24和36 h,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测H929细胞增殖抑制率,TUNEL法和荧光显微镜检观察Here29细胞形态变化及凋亡,AnnexinV-FITC/PI双集流式细胞术检测细胞凋亡率,蛋白印迹技术(Western blot)检测BAX、BCL-2、caspase-3、PARP、p38、JNK、ERK以及PI3K、Akt的表达变化。结果:ORI 8-16μmol/L体外显著抑制H929细胞增殖,并与浓度及时间呈正相关(P<0.05,P<0.05;r=0.961,r=0.973)。TUNEL染色法检出细胞核固缩、核碎裂;流式细胞术显示,H929细胞凋亡率呈浓度依赖性递增(P<0.05,r=0.88);Western blot检测结果提示,pro-caspase-3、BCL-2、p-PI3K、p-Akt表达呈浓度依赖性递减(r=0.9861,r=0.9725,r=0.9413,r=0.9373),而BAX、Cleaved PARP及p-p38、p-JNK、p-ERK表达递增(r=0.9178, r=0.8877,r=0.882,r=0.9645,r=0.8623)。结论:一定浓度ORI在体外能有效抑制骨髓瘤细胞H929的增殖,并诱导细胞凋亡,其可能的分子机制与上调MAPK及下调PI3K/Akt信号通路相关蛋白有关。
2019年02期 v.27;No.138 458-463页 [查看摘要][在线阅读][下载 1703K] [下载次数:357 ] |[引用频次:9 ] |[阅读次数:231 ] - 葛雪苹;洪亚婷;李亚丽;李炳宗;
目的:探讨姜黄素对耐硼替佐米的骨髓瘤细胞的作用以及对Notch1信号通路表达的影响,进一步探索其潜在的作用机制。方法:分别将姜黄素、硼替佐米及姜黄素+硼替佐米作用于骨髓瘤细胞系RPMI8266、U266、耐5 nmol/L硼替佐米的RPMI 8266(RPMI8226-V5R)、耐5 nmol硼替佐米的U266(U266-V5R)及骨髓瘤CD138+浆细胞,应用MTT法检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测凋亡相关蛋白的表达;利用notch1抑制剂DAPT及RNA干扰技术抑制细胞内notch1表达,重复上述实验。结果:与单药组相比,联合作用组可进一步抑制细胞增殖,增加细胞凋亡,增强对Notch1信号通路的抑制作用(P<0.05);而抑制Notch1可以减少细胞的增殖,并增加凋亡相关蛋白Cleaved caspase-3的表达水平。结论:姜黄素能够增强骨髓瘤细胞对硼替佐米的敏感性,此作用可能与Notch1受抑制有关。
2019年02期 v.27;No.138 464-471页 [查看摘要][在线阅读][下载 3905K] [下载次数:264 ] |[引用频次:9 ] |[阅读次数:175 ] - 李承君;夏海龙;吴燕明;丁刚;许丹丹;
目的:研究血清补体C3、C4在多发性骨髓瘤(MM)患者中的检测意义,并探讨其与骨髓瘤骨病(MBD)的相关性。方法:采用散射比浊法定量分析69例初诊MM患者以及30例健康体检者血清补体C3、C4水平;采用双能骨密度仪(DXA)测量69例初诊MM患者以及30例健康体检者的正位L1-4椎体、双侧股骨颈、双侧髋关节的骨密度值。结果:MM患者组血清补体C3、C4水平明显高于对照者(P<0.01);ISS临床分期中进展期患者的血清补体C3、C4水平明显高于稳定期患者(P<0.01);在不同MBD分组中,分级C级的补体C3、C4水平明显高于A级和B级(P<0.01);MM患者血清补体C3、C4表达水平与其L1-4椎体、左右股骨颈和左右髋关节整体的骨密度呈负相关,相关系数分别为r=-0.938,r=-0.659,r=-0.745,r=-0.748,r=-0.596和r=-0.908,r=-0.623,r=-0.710,r=-0.714,r=-0.595。结论:MM患者血清中补体C3、C4水平升高,与MM患者骨病严重程度及骨密度相关,这提示,补体C3、C4在MBD发生发展中可能发挥重要作用,血清中C3、C4水平可能是MBD的敏感生物标志物。
2019年02期 v.27;No.138 472-476页 [查看摘要][在线阅读][下载 1085K] [下载次数:304 ] |[引用频次:10 ] |[阅读次数:154 ] - 张建国;李玉鹏;方梓青;黄幸儒;陈旭;方坚;
目的:探讨小片段RNA(siRNA)干扰β-catenin基因表达对多发性骨髓瘤细胞系RPMI-8226耐药性的影响。方法:体外培养多发性骨髓瘤细胞系RPMI-8226,通过药物浓度梯度递增法建立马法兰耐药细胞模型;β-catenin-siRNA瞬时转染耐药细胞株,采用CCK-8法检测转染前后细胞对马法兰的敏感性变化,应用qRTPCR、Western-blot法分别检测β-catenin基因和蛋白表达水平的变化,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果:耐药骨髓瘤细胞经β-catenin-siRNA转染后对马法兰的IC50值由(5.29±0.19)μmol/L降至(1.88±0.64)μmol/L。Western-blot法检测显示,瞬时转染β-catenin-siRNA后β-catenin蛋白表达水平明显较转染前降低;转染后马法兰诱导细胞凋亡率由(35±0.5)%升高到(54±0.4)%,提示β-catenin基因可能与细胞耐药性相关,干扰β-catenin基因表达可提高耐药骨髓瘤细胞对于马法兰的敏感性。结论:β-catenin-siRNA干扰可抑制Wnt/β-catenin信号途径中β-catenin基因表达,抑制细胞增殖,增强马法兰对耐药骨髓瘤细胞株RPMI-8226毒性,增加细胞凋亡率。
2019年02期 v.27;No.138 477-481页 [查看摘要][在线阅读][下载 2455K] [下载次数:229 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:240 ] - 李玉鹏;张建国;方梓青;黄幸儒;陈旭;李振杰;方坚;
目的:探讨补肾养骨汤对人多发性骨髓瘤耐药细胞KM3/BTZ耐药性及增殖的影响,为补肾养骨汤在骨髓瘤治疗方面的前景和应用提供参考。方法:采用硼替佐米(bortezomib,BTZ)浓度梯度诱导法建立人多发性骨髓瘤耐药细胞KM3/BTZ,通过MTT法检测常用化疗药物以及含补肾养骨汤药血清对KM3细胞和KM3/BTZ细胞增殖的影响,采用RT-qPCR及Western blot法检测Par-4、HSP27和P-gp基因表达变化,采用流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果:建立的KM3/BTZ细胞对常用化疗药物均可产生不同程度的耐药性,其中BTZ的耐药指数(RI)最高,为20.269。MTT法检测结果显示,经含补肾养骨汤药血清处理过的KM3/BTZ细胞增殖受抑制,且随含补肾养骨汤药血清浓度升高抑制作用呈增强趋势。含补肾养骨汤药血清可抑制KM3/BTZ细胞增殖,诱导其凋亡,明显降低KM3/BTZ细胞耐药性,上调Par-4表达,下调HSP27和P-gp表达。结论:补肾养骨汤能有效抑制KM3/BTZ细胞增殖,诱导其凋亡,逆转KM3/BTZ细胞多药耐药性,其机制可能与HSP27和P-gp表达下调,Par-4表达升高有关。
2019年02期 v.27;No.138 482-488页 [查看摘要][在线阅读][下载 2338K] [下载次数:192 ] |[引用频次:7 ] |[阅读次数:176 ] - 孙延庆;李青芬;张启科;魏小芳;冯友繁;
目的:探讨中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)对多发性骨髓瘤(MM)患者预后评估的价值。方法:以65例初发MM患者和83例同期健康体检者,根据血常规结果计算得出NLR,比较2者差异;并以中位数为临界值,将病例组患者分为低NLR组(NLR <2.34)和高NLR组(NLR≥2.34),分析2组患者在年龄、性别、血清钙(Ca)、血清β2微球蛋白(β2-MG)、白蛋白(Alb)、血肌酐(Cr)、血红蛋白(Hb)、红细胞分布宽度(RDW)及乳酸脱氢酶(LDH)水平的差异;比较高NLR组和低NLR组患者生存率的差异;单因素及COX多因素回归分析各指标与MM患者预后的关系。结果:MM患者NLR水平高于对照组(z=-2.415,P水平偏高,但差异无统计学意义;单因素分析结果显示,NLR、β2-MG及ALB是MM患者预后的危险因素;多因素分析显示,NLR及Alb水平是影响MM患者预后的独立危险因素。结论:初诊MM患者NLR升高提示预后不良,是影响预后的独立危险因素。
2019年02期 v.27;No.138 489-493页 [查看摘要][在线阅读][下载 1189K] [下载次数:261 ] |[引用频次:20 ] |[阅读次数:220 ]
- 张婧玲;曹颖平;李景岗;
目的:系统评价地西他滨联合CAG方案(DCAG方案)治疗中、高危MDS及AML的临床疗效及安全性。方法:计算机检索PubMed、EMbase、The Cochrane Library、WanFang Data和CNKI等数据库,搜集DCAG方案对比地西他滨单药方案或CAG方案治疗中、高危MDS及AML的随机对照试验(RCT),检索时限从建库至2018年3月。所纳入RCT依据Cochrane风险偏倚评价工具进行质量评价,采用RevMan 5.3进行Meta分析,结果共纳入24个RCT,包括1 557例中、高危MDS及AML患者,其中594名为AML患者,590名为MDS患者。采用DCAG方案治疗的列入DCAG组,采用地西他滨单药方案或CAG方案治疗的列入对照组。结果:Meta分析结果显示:与对照组比较,DCAG方案治疗中、高危MDS及AML患者的完全缓解率高(RR=1.63,95%CI=1.43-1.85,P<0.000 01),总体有效率也高(RR=1. 35,95%CI=1.24-1.46,P<0.000 01);亚组分析结果显示,在完全缓解率方面DCAG方案好于CAG方案(RR=1.71,95%CI=1.49-1.97,P<0.000 01),稍好于地西他滨单药方案(RR=1.43,95%CI=1.08-1.91,P=0.01)。在不良反应方面,两组的肺部感染、消化道反应、骨髓抑制、出血事件发生率等方面无统计学差异(P>0. 05)。结论:DCAG方案治疗中、高危MDS及AML具有切实而显著的疗效,且优于CAG方案和地西他滨单药方案,两者不良反应事件发生无统计学差异。由于缺乏大样本RCT的支持,上述结论尚待更多高质量研究予以验证。
2019年02期 v.27;No.138 494-503页 [查看摘要][在线阅读][下载 4611K] [下载次数:532 ] |[引用频次:30 ] |[阅读次数:408 ] - 周捷;吴昊;李冰;梁爱斌;傅建非;
目的:通过检测原发性高嗜酸粒细胞增多症患者FGFR1、FLT3、MPL及JAK2基因突变的情况,初步探讨其在该疾病发病机制中的作用及对病情严重程度和患者预后的影响。方法:应用直接测序法检测原发性高嗜酸粒细胞增多症患者是否存在FGFR1基因、FLT3基因、MPL基因和JAK2基因的突变。结果:在1例临床症状严重且治疗无效的患者检测到FLT3基因酪氨酸激酶活性区域新的缺失突变,该突变导致编码区提前结束;在19例患者中发现了FGFR1基因新的单核苷酸多态性(SNP)位点,该SNP导致2个氨基酸的缺失;未检测到MPL基因和JAK2 V617F基因突变。结论:FGFR1基因6个碱基的缺失(1014_1019del AACAGT)是原发性高嗜酸粒细胞增多症患者的非同义SNP(nsSNP)位点。FLT3基因的缺失突变可能与恶性临床特征和不良预后有关。
2019年02期 v.27;No.138 504-508页 [查看摘要][在线阅读][下载 1579K] [下载次数:125 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:130 ] - 郭素青;石锐;陈园园;刘珊;李英华;
目的:探讨低剂量地西他滨对老年骨髓增生异常综合征(MDS)患者血清可溶性CD44与GDF11水平及造血功能的影响。方法:2015年10月至2017年10月本院收治的老年骨髓增生异常综合征(MDS)患者99例,随机分为A、B、C 3组,每组各33例。A组采用低剂量地西他滨治疗,B组采用常用剂量地西他滨治疗,C组采用低剂量地西他滨联合G-GSF、阿糖胞苷、阿克拉霉素治疗。治疗结束后,比较3组患者治疗前、后血清可溶性CD44,GDF11水平和造血功能指标(sTfR/E)变化情况,分析3组患者临床缓解率及不良反应发生率。结果:治疗前,3组患者血清可溶性CD44、GDF11以及sTfR/E水平比较无统计学差异(P>0.05)。治疗结束后,3组患者血清CD44及GDF11水平显著下降,而sTfR/E水平显著上升,3组间比较无统计学差异(P>0.05)。治疗后,A、B、C 3组总缓解率分别为84.8%、81.8%和78.8%,经比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗期间,在非血液毒性不良反应发生率中A组为9.1%,显著低于B组和C组的30.3%和27.3%(P<0.05,P<0.05);在血液毒性不良反应中A组为39.4%,显著低于B组和C组的63.7%和53.7%(P<0.05、 P<0.05)。结论:单用低剂量地西他滨治疗老年MDS患者相较于常规剂量及联合治疗方式,其临床疗效一致,且显著降低患者可溶性CD44和GDF11的水平,而且患者造血功能有改善,不良反应发生低,因而可作为临床治疗MDS的新选择。
2019年02期 v.27;No.138 509-514页 [查看摘要][在线阅读][下载 1265K] [下载次数:110 ] |[引用频次:7 ] |[阅读次数:168 ] - 潘鹏吉;罗章琴;
目的:探讨地西他滨(DAC)和CAG/HAG预激化疗方案治疗骨髓增生异常综合征(MDS)难治性贫血合并原始细胞增多(RAEB)的疗效及其安全性的差异。方法:回顾性分析本院2014年2月-2018年2月收治MDS-RAEB患者共86例临床资料。在86例中41例采用DAC方案,设为A组,而其余45例采用CAG/HAG方案,设为B组;比较2组的疾病控制效果、起效疗程、中位生存时间及不良反应的发生率。结果:2组患者CR率和ORR率比较差异无显著性(P>0.05);A组mCR率显著高于B组(P<0.05);A组第2、3疗程显效病例数显著多于B组,但第1疗程显效的病例数在B组多于A组(P<0.05);2组患者中位OS比较差异无显著性(P>0.05);A组粒细胞缺乏持续时间显著短于B组(P<0.05);A组红细胞和血小板输注量均显著少于B组(P<0.05);A组不同疗程时3-4级中性粒细胞缺乏、贫血及血小板减少发生率均显著低于B组(P<0.05);A组第3疗程时3-4级感染发生率显著低于B组(P<0.05)。结论:DAC和CAG/HAG预激化疗方案用于MDS难治性贫血合并RAEB患者的总体病情控制效果接近,但DAC方案能使不良反应的风险更低,而CAG/HAG方案起效更快。
2019年02期 v.27;No.138 515-519页 [查看摘要][在线阅读][下载 1144K] [下载次数:110 ] |[引用频次:7 ] |[阅读次数:191 ]
- 孙婷;刘晓帆;刘葳;黄月婷;付荣凤;谷文静;董焕;高聿琛;杨仁池;张磊;
目的:探讨中国原发性血小板增多症(essential thrombocythemia,ET)患者的症状负荷与临床特征(突变状态,治疗方案,性别差异)的关系,为其治疗和预后判断提供依据。方法:使用骨髓增殖性肿瘤总症状评估量表(MPN-SAF-TSS或MPN 10)对173例中国ET患者进行现场和网络症状评估,根据突变状态将患者分为JAK2V617F突变阳性组,CALR突变阳性组,非三阴性组;根据治疗方案将患者分为羟基脲(Hu)治疗组和干扰素(IFN-α)治疗组;根据性别将患者分为男性患者组和女性患者组。结合症状评分回顾性分析患者的病例资料。结果:各组患者均表现出由低至高的症状负荷,其中Hu治疗组患者症状负荷最高(总症状评分[TSS]为14.7;范围7ALR.6-14.7);与对照组相比,JAK2V617F阳性组、Hu治疗组和女性患者组具有更高的总症状和独立症状评分。C阳性组和IFN-α治疗组的总症状和独立症状得分均低于缺乏相应特征的对照组。JAK2V617F阳性、Hu治疗和女性患者这3个因素的累加会导致更严重的症状负荷。结论:中国ET患者的症状负荷与患者的突变状态、治疗选择和性别差异显著相关,制定治疗方案和进行预后判断时应综合考虑患者的症状负荷和相关临床特征。
2019年02期 v.27;No.138 520-526页 [查看摘要][在线阅读][下载 1459K] [下载次数:299 ] |[引用频次:1 ] |[阅读次数:269 ] - 张乐;宋新龙;王爱迪;张珊;王萍萍;刘宝山;
目的:对γ射线(~(137)Cs)联合环磷酰胺与氯霉素介导的获得性再生障碍性贫血小鼠模型进行改进研究,为再生障碍性贫血发病机制和治疗的研究提供稳定模型。方法:BALB/c小鼠经3-5 Gy~(137)Csγ射线(91 cGy/min)照射后,于d 4、5、6腹腔注射环磷酰胺25 mg/(kg·d)、氯霉素62. 5 mg/(kg·d),观察其外周血白细胞计数、网织红细胞计数、骨髓涂片及骨髓有核细胞计数、骨髓病理切片等指标。结果:经~(137)Csγ射线照射联合环磷酰胺、氯霉素腹腔注射的BALB/c小鼠的外周血三系细胞均迅速减少,其中白细胞、血小板、网织红细胞表现得尤为明显;于d14降至最低,在d 28三系细胞仍然严重减少,骨髓有核细胞数量明显下降,骨髓增生程度呈减低或重度减低;骨髓病理切片示造血细胞重度减少;脂肪细胞等非造血细胞增多。结论:通过~(137)Csγ射线照射并联合环磷酰胺、氯霉素腹腔注射的小鼠模型,其各项检测指标均达到获得性再生障碍性贫血的诊断标准,可作为获得性再生障碍性贫血发病机制及治疗研究的小鼠模型。
2019年02期 v.27;No.138 527-533页 [查看摘要][在线阅读][下载 545K] [下载次数:220 ] |[引用频次:11 ] |[阅读次数:174 ] - 周典;程海;陈伟;李振宇;徐开林;
目的:探讨初诊初治时中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)对原发性血小板增多症(ET)患者血栓事件发生和进展的影响及临床意义。方法:回顾性分析150例原发性血小板增多症患者临床和随访资料,用统计学方法分析血栓事件的危险因素。结果:年龄(P=0.001)和JAK2V617F突变(P=0.003)是诊断时血栓事件独立危险因素;年龄(P=0.037)、NLR(P<0.001)、WBC计数(P=0.047)及初诊时血栓病史(P=0.036)是随访过程中未来血栓事件进展的独立危险因素;ROC WBC计数以及初诊时血栓病史。Kaplan-Meier生存分析表明,高NLR组血栓事件无进展生存时间(中位生存时间22.3个月, 95%CI:17.8-26.8)明显低于低NLR组(中位生存时间55.5个月, 95%CI:53.4-57.5)。低NLR组60个月血栓事件无进展生存率为97.4%,而高NLR组60个月血栓事件无进展生存率为46.7%。结论:ET患者初诊初治时外周血NLR水平较传统临床指标对未来血栓事件进展具有更好的诊断预测价值,但与诊断时已经发生的血栓事件没有明显相关性。
2019年02期 v.27;No.138 534-538页 [查看摘要][在线阅读][下载 1204K] [下载次数:173 ] |[引用频次:9 ] |[阅读次数:194 ] - 苏谐;刘徽;孙娜;程鹏;邓东红;龙媛;
目的:通过检测地中海贫血患者血浆组织因子微粒(TF+MP)的促凝活性、凝血及抗凝物、纤溶功能、内皮细胞功能及血小板(Plt)计数,探讨广西地区地中海贫血患者是否存在可能引起血液高凝状态及血栓形成的高危因素。方法:对71例地中海贫血组及20例正常对照组分别用发色底物法检测血浆TF+MP促凝活性,ELISA法检测血浆组织因子(TF)、组织因子途径抑制物(TFPI)、蛋白C(PC)、蛋白S(PS)、抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)、组织型纤溶酶原激活物(t-PA)、凝血酶激活的纤溶抑制物(TAFI)、可溶性E选择素(sE-sel)、细胞间粘附分子-1(sICAM-1)、血栓调节蛋白(sTM)水平。结果:重型β地中国贫组(TM组)AT-Ⅲ水平较对照组降低(P <0.05),TM组AT-Ⅲ与Plt计数成独立正相关(rPLT=0.37,P <0.05);中间型α地中海贫血组(TA组)TF及sICAM-1水平较对照组显著降低(P <0.01);中间型β地中海贫血组(TI组)血浆TF+MP促凝活性较对照组显著增高(P <0.05)并与AT-Ⅲ呈独立正相关(rAT-Ⅲ=0.77,P <0.05)。地中海贫血患者肝功能正常组TF及sICAM-1水平较对照组降低(PTF<0.01,PsICAM-1<0.05),肝功正常组与非正常组间TF+MP活性有显著性差异(P <0.05);其余各组相应指标与对照组相比及组间相比无显著性差异。结论:广西重型β地中海贫血患者有肝功能损害及抗凝物质的减少;中间型β自中海贫血患者血浆TF+MP的促凝活性异常增高;以上因素可能增加地中海贫血患者血液高凝状态或血栓形成的风险,但中间型α地中海贫血患者血浆sICAM-1及TF水平降低可能是中间型α地中海贫血患者及肝功正常患者抗血栓形成的保护性因素。
2019年02期 v.27;No.138 539-544页 [查看摘要][在线阅读][下载 1100K] [下载次数:127 ] |[引用频次:5 ] |[阅读次数:150 ] - 叶丽花;潘慧娟;胡君燕;陈世新;
目的:探讨广西来宾市兴宾区育龄人群α和β地中海贫血的基因突变类型及分布特征,为制定防治措施提供科学依据。方法:对2017年1月至2017年12月就诊于本院产前保健科6 498例当地育龄人群采用血细胞五分类和血红蛋白电泳分析指标筛查地中海贫血高危人群,对高危人群采用跨越断裂点的聚合酶链式反应(Gap-PCR)技术和PCR结合反向点杂交(PCR-RDB)技术诊断并分析α、β地中海贫血阳性病例的基因突变类型及其频率。结果:地中海贫血初筛阳性1 432例,初筛阳性率为22.04%,基因诊断确定为地中海贫血基因阳性920例,阳性率为14.16%。在920例中检岀α-地中海贫血593例(64.45%),基因突变类型19种,α缺失型基因以--SEA为主(47.22%),α突变型基因以αCSα为主(13.66%);β-地中海贫血260例(28.26%),基因突变类型9种,以β41-42βN为主(50.38%),其次是β17/βN(38.08%),2种基因突变类型占88.46%;αβ复合型地中海贫血67例(7.28%)。以--SEA/β41-42(17.91%)和-α3.7/β41-42(17.91%)为主。结论:来宾市兴宾区育龄人群常见的α-和β-地中海贫血具有基因复杂多样性和显著的遗传异质性。本研究结果为制订地中海贫血的预防计划和开展优生工作提供参考。
2019年02期 v.27;No.138 545-548页 [查看摘要][在线阅读][下载 1078K] [下载次数:267 ] |[引用频次:25 ] |[阅读次数:210 ]
- 张孝天;齐昆明;曹江;徐开林;程海;
目的:建立徐州地区正常成人血细胞参数的参考区间。方法:在徐州医科大学附属医院体检中心应用血细胞分析仪,检测正常人群(男性41 257人,女性41 257人,共82 514人)静脉血红细胞计数、血小板计数、白细胞计数等相关参数。结果:各项参数的参考区间如下:红细胞计数(RBC)在男性为(4.33-5.51)×10~(12)/L,在女性为(3.82-4.85)×10~(12)/L;血红蛋白水平(Hb)在男性为(132-172)g/L,在女性为(107-145)g/L;红细胞压积(HCT)在男性为(40-50)%,在女性为(34-44)%;血小板计数(Plt)在男性为(113-268)×10~9/L,在女性为(126-289)×10~9/L;白细胞计数(WBC)在男性为(4.00-9.40)×10~9/L,在女性为(3.54-9.30)×10~9/L;中性粒细胞计数(NEUT)在男性为(1.91-5.76)×10~9/L,在女性为(1.67-5.30)×10~9/L;单核细胞计数(MONO)在男性为(0.18-0.58)×10~9/L,在女性为(0.16-0.52)×10~9/L;淋巴细胞计数(LYM)在男性为(1.3-3.4)×10~9/L,在女性为(1.2-3.1)×10~9/L等等。结论:徐州地区成人部分血细胞参数,与国内外相关调查结果对比有显著差异。其中徐州地区成年女性Hb参考区间的下限明显偏低,成人的Plt计数参考区间上、下限明显低于国内外其他地区,而WBC计数参考区间上、下限与国内地区接近,但低于部分国外地区。初步建立徐州地区成人血细胞参考区间,其中RBC、Hb、HCT和Plt具有明显的性别差异,已为其分别建立了参考区间。
2019年02期 v.27;No.138 549-556页 [查看摘要][在线阅读][下载 1243K] [下载次数:100 ] |[引用频次:7 ] |[阅读次数:195 ] - 伍昌林;何建安;顾大勇;邵永红;党鑫堂;朱奕;王诗月;易品;邵超鹏;
目的:探讨利用表面等离子体共振(Surface plasman resonance,SPR)技术对红细胞血型同种抗体筛选与鉴定的可行性,为红细胞输注相容性检测提供一种新方法。方法:采用氨基偶联法在SPR芯片表面固定红细胞抗原谱,优化芯片分析条件,检测红细胞血型抗体阳性对照血清,分析SPR芯片技术的检测性能;对比研究SPR芯片技术与微柱凝集法检测129例长期输血的地中海贫血患者临床样本的一致性;同时运用SPR芯片技术对7例血型抗体阳性患者输血前进行血型抗体鉴定,选择红细胞抗原相容性血液输注;跟踪评价红细胞输注效果。结果:SPR芯片技术检测血型同种抗体的重复性、敏感性与特异性均较好;SPR技术与微柱凝集法对129例临床样本血型同种抗体筛查结果显示,2种方法无显著性差异(χ2=0.333, P> 0.05),总体一致性为97.2%;SPR技术对7例血型同种抗体阳性患者鉴定结果为:抗-E 3例、抗-M 1例、抗-C 1例、抗-Jka 1例、自身抗体1例,与微柱凝集法鉴定结果基本一致;SPR技术选择配合性输血后,6例患者红细胞输注有效,1例患者存在自身抗体输注无效。结论:SPR芯片技术筛检与鉴定红细胞血型抗体的性能与微柱凝集法总体一致,而SPR技术操作更简便快速、高通量且非标记,可满足批量红细胞输注前血型同种抗体快速筛查和鉴定的基本要求。
2019年02期 v.27;No.138 557-562页 [查看摘要][在线阅读][下载 3091K] [下载次数:197 ] |[引用频次:1 ] |[阅读次数:180 ] - 王红苹;夏培元;
目的:采用代谢组学的研究方法,分析红细胞在MAP保存液中不同储存阶段的代谢特征,探索红细胞在MAP保存液中的代谢标志物。方法:运用超高效液相色谱-四级杆飞行时间串联质谱(UPLC-MS/MS)技术检测10袋MAP去白细胞的悬浮红细胞在制备当天(d 0)、储存第14 d(d 14)、储存期末(d 35)等3个不同储存阶段红细胞内和上清液中的代谢物变化情况,采用主成分分析法(PCA)分析不同储存时间的红细胞差异性特征离子和代谢标志物。结果:红细胞内和上清液中提取物在存储初期、中期和末期3个储存阶段检测到的特征离子数能够得到明显区分。乳酸、烟碱胺、葡萄糖、5-羟脯氨酸和苹果酸等5种红细胞代谢相关物质在3个储存阶段水平差异均有统计学意义,可以作为红细胞储存期内的代谢标志物。结论:UPLC-MS/MS方法结合多变量数据统计分析可用于红细胞代谢特征研究,红细胞在不同储存阶段的差异性代谢物质可作为红细胞储存期质量检测标志物,本研究结果为研究红细胞储存期质量变化提供依据。
2019年02期 v.27;No.138 563-568页 [查看摘要][在线阅读][下载 1372K] [下载次数:105 ] |[引用频次:5 ] |[阅读次数:195 ] - 林树波;郑泽旋;张锐;
目的:探讨基于化学发光的免疫分析试验在血液筛查中的应用及效果评价。方法:对3 530例无偿献血者标本应用ELISA法和CLIA法试剂分别筛查HBsAg、抗-HCV、抗-HIV和TP,然后对HBsAg、抗-HCV和抗-HIV ELISA法阴性全部标本和ELISA+/CLIA-标本再应用NAT进一步复检;对ELISA法和CLIA法TP单阳性以及双阳性标本采用TPPA法进一步确证。结果:CLIA法与NAT法检测结果的一致性较好,较ELISA法检测重复性好,灵敏度高;对于CLIA+/ELISA-标本,ELISA法存在漏检结果,特别是对于病毒载量浓度较低或处于"窗口期"的献血者容易被漏检。结论:ELISA法与CLIA法在血液筛查中具有优势互补性,可以提高血液筛查检测的灵敏度,减少漏检和缩短检测时间。在血液筛查中引入CLIA法试剂对于保证血液质量和临床输血安全具有重要意义。
2019年02期 v.27;No.138 569-572页 [查看摘要][在线阅读][下载 1075K] [下载次数:228 ] |[引用频次:17 ] |[阅读次数:133 ]